尖孢镰刀菌（Fusarium sp．）可侵染多种植物，是很多植物维管束病害的病原真菌，常引起枯萎病，是重要的真菌类群。开展的功能基因基因组学研究，对于了解镰刀菌的致病性及其变异的分子机理，具有重要的理论和实际意义。本研究利用农杆菌侵染和转化真菌的特性，建立了尖孢镰刀菌西瓜专化型（WTF）的遗传转化体系，并构建了突变体库，为WTF的致病相关基因克隆和功能基因组学研究奠定基础。 1、对进行WTF遗传转化的关键条件、因素和参数进行筛选和优化。结果表明：在相同条件下WTF在PDA培养基上产孢量最多，其次是CA培养基，再次是V8培养基，产孢子量最少的是OA培养基；无论在那种培养基上，连续光照的分生孢子产量比黑暗条件高；潮霉素对WTF的生长具有良好的抑制效应，但抑制效果因培养基不同而略有差异，MM培养基中潮霉素浓度50 μg／ml时已经能很好抑制WTF的生长，但在PDA培养基中则相对较难抑制WTF生长，由此确定75 μg／ml为使用PDA培养基进行WTF遗传转化的潮霉素最适浓度：农杆菌AGL-1转化WTF的效率明显高于菌株LBA4404和EHA105；共培养前对农杆菌用IM液体培养基（AS 400μmol／L）诱导6小时获得最佳的遗传转化效率；农杆菌的OD₆₆₀为0.15-0.2，WTF孢子浓度为1×10⁶个／ml，将其等体积混合后每皿涂150μl混合液，在26℃共培养48小时转化效果最理想。 2、将各种参数、条件组成镰刀菌遗传转化体系，并利用该体系对WTF进行遗传转化操作和转化质量检验。结果表明：平均每1×10⁶个WTF孢子可得到320-500个抗潮霉素的阳性克隆；从获得的WTF抗潮霉素菌株（TF）随机抽样进行PCR检测，结果100％能扩出特征目的条带，而且负对照和空中国热带农业科学院华南热带农业大学2004届硕士毕业论文白对照均无特征条带出现，表明该遗传转化的假阳性率低;在无潮霉素选择压力条件下经连续转接6代培养，仍然表现出潮霉素的抗性，表明获得的TF的插入标记稳定。 3、利用组装起来的遗传转化体系，对盯F进行比较大规模的遗传转化，获得1884个TF，分析、比较其中867个TF与野生型的菌落形态、菌落颜色、产抱量等表型的差异，得到相关突变体26个，突变率约为3%，其中生长缓慢的突变占0.12%，菌落形态的突变占0.23%，菌落颜色的突变占3.低，不产抱子的突变占0.12%:随机选取867个TF进行西瓜胚根接种法检测致病力，结果862个TF能正常致病，4个TF不引起任何症状，l个TF虽然可以致病，但病害轻微。将这5个致病力丧失（减弱）的TF接种到盆钵西瓜幼苗上，结果均不致病。初步推测，这5个TF的致病相关基因己经被潮霉素抗性基因（如力）及其调控启动子才动口插入而丧失致病能力或致病力显著下降。将这几个突变体分别命名为FocNZ192、F优N2195、F0CN3181、F0CN3280和FOCN3179。