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目的:探讨针对α1,3岩藻糖基转移酶-Ⅵ(α1,3-fucosyltransferase-Ⅵ,FUT6)的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)瞬时转染高表达靶基因的人肝癌细胞株HepG2,较全面的观察转染后FUT6基因的沉默对肝癌细胞株HepG2生物学特性的影响,初步探讨FUT6基因在肝癌细胞侵袭和转移中的作用,对肝癌FUT6基因治疗的可行性提供初步依据。 方法:通过荧光定量PCR(Real-time PCR)检测3种肝癌细胞株HuH-7,SMCC-7721和HepG2相比较于正常肝细胞株HL-7702的α1,3岩藻糖基转移酶(FUTs)表达的差异,确定在肝癌细胞中特异性表达的α1,3岩藻糖基转移酶亚型。靶向FUT6的siRNA转染肝癌细胞株HepG2后,通过western blot检测FUT6蛋白的表达,通过流式细胞术检测肝癌细胞表面抗原唾液酸路易斯糖(Sialyl Lewis X,sLeX)表达情况。Transwell小室方法进行细胞迁移和侵袭实验检测肝癌细胞株HepG2转移和侵袭能力的变化。 结果:以正常肝细胞株HL-7702的个基因表达量为基准,FUT6的基因表达量在三个肝癌细胞株HuH-7,HepG2和SMCC-7721分别是基准表达量的25.0,3.8和2.6倍。另外两个α1,3岩藻糖基转移酶:FUT4和 FUT7,分别在 HL-60细胞株中升高10.8和250.0倍,但是它们在肝癌细胞株中是不升高甚至明显降低。FUT9在HuH-7细胞株中升高了400.0倍,但在其他肝癌细胞株HepG2和SMCC-7721中不升高。在HepG2细胞中FUT6升高是排他性的,选择在肝癌细胞株HepG2中研究FUT6。 实验分为3组,分别命名为control(空白对照组),mock(阴性对照scrambled-siRNA)和siRNA-FUT6(实验组)。实验组FUT6蛋白较空白对照组降低75.8％,阴性对照组与空白对照组无明显差异。实验组sLeX抗原较空白对照组降低89.3%,阴性对照组与空白对照组无明显差异。相比于空白对照组,实验组细胞的迁移能力降低了73.3%,侵袭能力降低了73.7%。 结论:肝癌细胞株高表达FUT6基因;siRNA靶向沉默FUT6减少了FUT6蛋白的表达,减少了肿瘤相关抗原sLeX的表达,削弱HepG2细胞在体外的迁移和侵袭能力。