TRX及TXNIP在溃疡性结肠炎患者中的表达及作用机制的研究

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溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是常见的消化内科疾病之一,其发病率在国内外均有逐年上升的趋势。UC可发生于任何年龄,病变主要累及结肠组织的黏膜层与黏膜下层。临床以腹泻、腹痛及黏液脓血便为主要表现,病情轻重不等,多呈反复发作。UC的病因迄今尚未完全明确,临床治疗方面仍很棘手。目前认为,UC的发病与免疫、遗传、环境、细菌移位等多种因素有关,氧化应激时产生的大量的氧化物(主要是氧自由基)是参与UC发病的一个重要原因,机体活性氧的形成和抗氧化系统的失衡在UC的组织损伤中起着重要的作用,并与其活动密切相关。硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)系统是一组氧化还原敏感的多功能小分子蛋白系统,在人体多种组织及细胞中均有表达,并行使着多种功能,它能够调节细胞氧化还原状态以对抗氧化应激,激活转录因子如核转录因子(nuclear factor kappa B,NF-κB)和转录激活蛋白1(activator protein-1,AP-1)促进细胞的生长与增殖以及与凋亡信号调节激酶1 ( apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK-1)作用抑制细胞凋亡等。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)是硫氧还蛋白的结合蛋白之一,通过抑制硫氧还蛋白系统的功能而发挥介导氧化应激、对抗细胞增殖及诱导细胞凋亡等作用,是硫氧还蛋白系统功能和表达的负性调节因子。TRX及TXNIP在氧化应激中均发挥着重要的作用,是机体维持氧化还原平衡的重要因子。关于TRX及TXNIP在UC中的研究目前国内外鲜有报道。目的:本课题通过检测UC患者血清及结肠组织中TRX及TXNIP的表达,分析这两种氧化应激因子与UC病情严重程度的相关性,探讨其在UC发生发展中可能的作用机制,从而为UC的治疗提供新的靶点与方向。方法:收集29例经临床表现、肠镜及病理证实为UC患者的外周静脉血及结肠粘膜活检组织做为病例组,另收集25例正常人的外周静脉血及结肠黏膜活检组织做为对照组。按照Southerland DAI评分标准对患者进行评分,并将患者分为轻中度活动组、重度活动组。其中轻中度活动组17例,重度活动组12例,各组间在年龄及性别等方面无统计学差异(P>0.05)。采用免疫组织化学染色方法对结肠组织中TRX及TXNIP的表达进行检测。采用酶联免疫检测技术(ELISA)对血清中TRX及TXNIP的表达水平进行检测。根据检测结果,对TRX、TXNIP与UC患者病情严重程度的相关性以及TRX与TXNIP之间表达的相关性进行统计学分析。结果:1血清学检测结果显示1.1血清中TRX在UC组的表达较正常对照组明显升高(P<0.05);TRX在各组中的表达水平为:正常对照组<轻中度活动组<重度活动组,轻中度活动组和正常对照组之间无明显差异(P>0.05),重度活动组和正常对照组及轻中度活动组之间均有明显差异(P<0.05)。1.2血清中TXNIP在UC组的表达较正常对照组明显升高(P<0.05);TXNIP在各组中的表达水平为:正常对照组<轻中度活动组<重度活动组,轻中度活动组和正常对照组之间无明显差异(P>0.05),重度活动组和正常对照组及轻中度活动组之间均有明显差异(P<0.05)。2免疫组织化学染色显示2.1结肠组织中TRX在UC组的表达较正常对照组明显升高(P<0.05);TRX在各组中的表达水平为:正常对照组<轻中度活动组<重度活动组,各组间的表达均有明显差异(P<0.05)。2.3结肠组织中TXNIP在UC组的表达较正常对照组明显降低(P<0.05);TXNIP在各组中的表达水平为:正常对照组>轻中度活动组>重度活动组,各组间的表达均有明显差异(P<0.05)。3相关性分析3.1血清中TRX的表达与UC患者病情的严重程度呈正相关,相关系数为0.421(P<0.05);TXNIP的表达与UC患者病情的严重程度呈正相关,相关系数为0.439(P<0.05)。3.2结肠组织中TRX的表达与UC患者病情的严重程度呈正相关,相关系数为0.940(P<0.05);TXNIP的表达与UC患者病情的严重程度呈负相关,相关系数为-0.940(P<0.05)。3.3在血清中TRX和TXNIP表达水平具有相关性,相关系数为0.930(P<0.05);在结肠组织中TRX和TXNIP表达水平具有相关性,相关系数为-0.551(P<0.05)。结论:1活动期UC患者血清中及结肠组织中TRX的表达随着病情的加重而升高,与UC患者病情的严重程度呈正相关,在一定程度上可以反映疾病的活动度。2活动期UC患者血清中的TXNIP的表达随着病情的加重而升高,与病情严重程度呈正相关,结肠组织中TXNIP的表达随着病情的加重而降低,与病情严重程度呈负相关。3 TRX及TXNIP作为氧化应激的相关因子,可能通过氧化应激机制参与了UC的发病,并在UC发生发展过程中发挥着重要的作用。4监测TRX和TXNIP的表达水平对UC患者的诊断及病情严重程度的评估具有重要意义。
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