微管阵列对增强UV-B辐射导致的小麦根尖细胞染色体畸变的影响

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大气的臭氧层能够使地球的生态系统保持平衡,平流层中的臭氧能够吸收存在于太阳辐射中的紫外线,而紫外线对于地球生物有非常大的破坏力,故保护臭氧层对于人类包括动、植物的正常生命活动来说,都有重大的意义。而近些年来,人类活动释放了大量的破坏臭氧层的污染气体使到达地面的紫外线辐射大幅增加,这对植物的生长代谢、生理生化、遗传发育都有着重大的破坏。小麦是全球重要的粮食作物之一,其总产量位居世界第二,增强UV-B对小麦造成的粮食减产不容忽视,因此,揭示小麦对接受增强的UV-B辐射后所做的应答与反映和其受到损伤的机制显得尤为重要。微管在植物的生长发育等形态建成的过程中起这非常重要的作用,他不仅是支撑细胞的骨架承担着细胞物质运输的通道,更是细胞有丝分裂中的关键因子。本研究使用黄草消(浓度为500μmol L–1)和增强UV-B辐射(剂量为10.08kJm-2day-1)处理小麦根尖细胞,设置了对照组、增强UV-B辐射组、黄草消处理组、黄草消和增强UV-B辐射复合处理组四个实验组别,研究了微管阵列对增强UV-B辐射导致小麦根尖细胞染色体畸变的影响。得到以下实验结论:1、通过tubulin-GFP和抗体标记微管的拟南芥的根和叶肉细胞的比较,对比了转GFP技术和免疫荧光标记技术对不同细胞标记的效果。并使用Western blot检测抗体与小麦根尖细胞中微管亚基的结合,证明抗体可以标记小麦中的微管阵列。2、使用激光扫描共聚焦显微镜观察四个处理组发现:黄草消处理可以使小麦根尖产生均等双核二倍体细胞,而黄草消和增强UV-B辐射复合处理使小麦根尖产生不均等双核二倍体细胞,并统计四个处理组中的双核均等与不均等现象,发现增强UV-B辐射和黄草消复合处理下,不均等分裂的双核的出现的几率会显著增加。3、在小麦根尖细胞分裂期,使用间接免疫荧光标记观察到增强UV-B辐射会导致微管阵列的畸变包括不对称的早前期带、不对称的纺锤体和有缺失的成膜体,此时增强UV-B辐射造成染色体畸变,但在微管解聚时,染色体同样畸变。4、对增强UV-B辐射导致的“三束分裂”中染色体与微管共定位显示,无论微管形成细胞板是否出现在细胞板位置,三束分裂并不依赖于微管阵列产生。由此我们推测:虽然微管的畸变也会引起染色体的畸变,但是在增强UV-B辐射引起染色体畸变的途径中,增强UV-B辐射并不是通过引起微管畸变来引起染色体畸变的,而有可能是通过影响了其他的有关细胞极性的因子来导致染色体的畸变。
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