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目的:探讨在胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的不同时期低氧处理对心肌细胞的影响。
方法:建立ES细胞向心肌细胞诱导分化的实验方法,在分化过程的不同时期采取低氧(氧浓度为4%)处理,并设立常氧组(约为20%)作为对照,用免疫荧光鉴定分化后的心肌细胞,以流式细胞技术检测低氧对ES细胞诱导分化心肌细胞的增殖、分化、凋亡的影响。
结果:诱导后的心肌细胞经免疫荧光检测显示,部分细胞呈α-辅肌动蛋白阳性(红色)、心肌肌钙蛋白I阳性(绿色);流式检测结果显示,与常氧组相比,悬滴低氧组α-actinin阳性细胞和cTnI阳性细胞的比率分别提高了12.55%(P<0.01**)和6.11%(P<0.05*),悬浮低氧组凋亡比率与常氧组相比明显提高(P<0.01**),悬滴低氧组处于S期的细胞比例与常氧组相比明显减少(P<0.01**)。
结论:扩增阶段低氧和悬滴阶段低氧可促进ES细胞向心肌细胞分化,以悬滴低氧为最佳;悬浮阶段低氧对分化过程不利。