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目的:通过构建过表达干细胞因子Oct4和Sox2的胃癌SGC7901细胞株,研究过表达干细胞因子Oct4和Sox2对SGC7901胃癌细胞干细胞特性、肿瘤学特性、及生物学特性的影响,并探讨Oct4及Sox2在肿瘤细胞中的作用机制。 方法:1.构建携带Sox2基因的重组质粒,慢病毒载体感染SGC7901-OCT4细胞株得到SGC7901-OCT4-SOX2稳转细胞株。2.利用荧光定量PCR、western-bloting检测过表达Oct4及Sox2的胃癌SGC7901细胞中胃癌干细胞标志基因表达情况。3.细胞增殖和耐药实验、细胞划痕实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验、球形克隆形成实验分别检测过表达Oct4及Sox2对胃癌SGC7901细胞细胞的增殖能力、耐药能力、迁移能力、侵袭能力及成瘤能力的影响。4.采用裸鼠成瘤实验,检测过表达Oct4和Sox2的胃癌SGC7901细胞的致瘤性。 结果:1.成功构建过表达Oct4及Sox2基因的稳转胃癌SGC7901细胞株。2.荧光定量PCR、western-bloting实验结果显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的Oct4、Sox2、CD44、E-cadherin相对表达水平分别有不同程度的增高,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR检测过表达基因Oct4和Sox2的胃癌SGC7901细胞的C-myc、K1f4相对表达水平无明显变化,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.细胞增殖和耐药实验检测显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的增殖能力和耐药能力增强,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.细胞划痕实验显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的迁移能力增强,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Transwell细胞迁移及侵袭实验检测显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的迁移侵袭能力增强,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.球形克隆形成实验检测显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的克隆成瘤能力明显升高,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。7.裸鼠体内成瘤实验检测显示:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞的致瘤性明显增强,瘤体大小明显增大,瘤体重量明显升高,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论:过表达Oct4和Sox2基因的胃癌SGC7901细胞干细胞特性、细胞的增殖能力、耐药能力、迁移能力、侵袭能力及致瘤瘤能力明显增强。表明Oct4和Sox2基因在胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭及致瘤方面发挥了重要的作用,且Oct4与Sox2基因具有一定的协同性。