菊苣多糖的分离纯化及其对大鼠的降脂作用

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菊宦(Cichorium intybuisL.)为菊科菊宦属多年生药食两用草本植物,根肉质、短粗。菊苣主要分布在欧洲、亚洲、北非,我国北京、辽宁、新疆、江西等省市也有分布,是维吾尔族和蒙古族常用药材。菊苣富含多糖、菊苣酸、生物碱、萜类等多种生物活性物质,其中关于菊苣多糖的研究引起了众多学者的关注。本文以菊苣根为原料,研究菊苣多糖提取工艺优化、分离纯化、体外抗氧化活性及其对大鼠的降脂作用,以期为菊苣多糖的产业化开发奠定基础。主要结论如下:1.利用Design Expert 8.05专业软件通过响应面法(RSM)优化微波辅助酶法提取菊苣多糖的工艺。微波辅助酶法的最佳工艺条件为:料液比1:30(g/mL),纤维素酶用量为2.5%,酶解温度55℃,酶解时间105 min,酶解pH值为5.5,微波功率480 W,微波处理时间3 min,酶解后迅速升温至100℃,灭酶15 min,调整pH为中性,然后进行热水浸提,菊苣多糖的提取率为(44.369土0.25)%。2.采用Sevag法、TCA法、盐酸法、酶法对菊苣多糖脱蛋白方法进行了比较研究,研究结果表明:酶法最佳脱蛋白方法。采用DEAE-52纤维素离子交换柱层析进行菊苣多糖的初步分离得到两个组分,分别命名为CIP-1和CIP-2。采用SephadexG-200凝胶柱层析对CIP-1和CIP-2进行纯化后均得到单一峰,CIP-1和CIP-2分别占过SephadexG-200层析柱前总多糖的84.12%和15.88.%。紫外扫描(UV-vis)、高效凝胶色谱法(HPGPC)、气相色谱-质谱联用仪(GS-MS)、红外光谱(IR)分析对CIP-1的分子量、单糖组成及结构进行分析,结果表明:CIP-1在波长270-280 nm处没有核酸和蛋白的特征吸收峰;CDM纯度较高,其相对分子量为8511D;CIP-1是由山梨糖、葡萄糖、果糖、葡萄糖醇4种单糖组成的杂多糖;经红外光谱检测表明CIP-1具有多糖类物质的特征吸收峰。3.通过测定CIP-1对DPPH自由基,羟基自由基清及还原力作用,结果表明:CIP-1对DPPH自由基、羟基自由基有较强的清除作用,且DPPH的清除能力要强于对.OH的清除能力,且清除作用随CIP-1浓度增加而提高。4.以SD雄性大鼠为模型动物研究CIP-1降脂保肝功能,将大鼠随机分为6组,空白对照组(NC)、高脂模型组(HMVD、阳性对照组(PC)、高剂量(HD)、中剂量组(MD)、低剂量组(LD)。用不同浓度的CIP-1灌胃大鼠35d,测定大鼠的体重变化、进食量变化、肝脏指数、大鼠血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)值、超氧化物歧化酶(SOD)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)和肝匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC),结果表明:CIP-1对高血脂大鼠有明显的降脂保肝作用。
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