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研究背景胶质瘤是颅内最常见的原发性神经上皮性肿瘤,是神经系统疾病中第二大威胁人类健康的疾病,其高复发率、高致残率、高病死率是目前治疗上存在的难题。目前临床治疗胶质瘤的主要方法以手术切除为主,辅助放、化疗以及基因治疗,但是效果不容乐观,因此寻找有效的能改善胶质瘤患者预后、提高生存率和生活质量的新的治疗方法迫在眉睫。胶质瘤的发病机理至今仍然不清楚,因此探讨胶质瘤发生发展的分子机制,将有利于更好地理解其发病过程,为临床治疗提供新的途径。糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是一个多功能的丝氨酸/苏氨酸类激酶,在真核生物中普遍存在。在哺乳动物中包括两个亚型,即GSK-3α和GSK-3β。其在肿瘤形成中发挥了重要作用,目前至少发现了Wnt、NF-κB以及PI3-K/Akt这三条与肿瘤密切相关的转导通路与该酶联系紧密。已有实验证实,通过对GSK-3的调节,可以促进肿瘤生长或者凋亡。随着对GSK-3在肿瘤细胞信号转导通路的深入研究,可为肿瘤发生、发展机制的阐明及肿瘤的治疗产生重要作用。Farago等研究表明,GSK-3β的突变或表达下调能够促进乳腺肿瘤的发生。氯化锂(LiCl)作为GSK-3β的抑制剂已有很多报道,是一个相对专一的抑制剂,而且需要一个相对较高的剂量(抑制常数Ki为mmol/l级)来抑制GSK-3β在细胞中的活性,其作用方式与Mg2+竞争。在老鼠体内试验研究发现Li离子会使GSK-3β的ser9磷酸化增加[1],从而抑制GSK-3β的活性,长期使用Li离子并没有引起癌症发生的危险,已经作为GSK-3β的抑制剂被广泛应用。很多研究表明,在肿瘤的发生发展过程中,大量信号转导途径异常激活或机制都涉及了GSK-3β,然而国内外文献报导结果不完全一致,本研究旨在探讨GSK-3抑制剂在胶质瘤细胞株增殖中的作用。研究目的应用GSK-3β抑制剂LiCl,对胶质瘤U251细胞增殖以及GSK-3β表达的影响。研究方法U251细胞复苏后,以含10%小牛血清的DMEM培养液于37℃5%CO2饱和湿度培养箱中培养,连续传代至对数生长期,在接种后24小时达到对数生长期,使用不同浓度LiCl分别作用U251 24h、48h,MTT试验检测细胞存活率;流式细胞仪分别检测细胞周期改变;细胞免疫化学检测GSK-3β蛋白的表达。研究结果不同浓度LiCl作用U251胶质瘤细胞后,MTT试验检测随着药物浓度的增高,U251细胞的增殖明显受到抑制;流式细胞仪检测U251细胞的细胞周期发生明显变化,增殖期细胞明显减少;细胞免疫化学检测GSK-3β蛋白的表达随着药物浓度的增高而表达增加,尤以细胞核增加明显。结论LiCl作为GSK-3β抑制剂,能明显抑制胶质瘤U251细胞株的增殖,而且能上调GSK-3β蛋白的表达。