论文部分内容阅读
目的：本课题通过动物实验观察不同光环境对幼兔眼轴长度、视网膜结构和功能,视网膜及血清多巴胺,以及视网膜色素上皮细胞D2受体表达的影响。探讨王育良教授提出的“日钟阴阳方”对不同光环境下对幼兔眼球发育干预作用及其作用节点,寻找中医药预防近视的切入环节。方法：1月龄健康新西兰幼兔,雌雄兼备,随机分成6组。自然光组：饲养在正常自然光线的照射环境中。LED灯组：饲养在LED灯环境。全光谱组：饲养在全光谱环境。自然光中药组：饲养在正常自然光线的照射环境,同时采用“日钟阴阳方”灌胃。LED灯中药组：饲养在LED灯环境,同时采用“日钟阴阳方”灌胃。全光谱中药组：饲养在全光谱环境,同时采用“日钟阴阳方”灌胃。遵循夏桂成阴阳钟调整理论的给药方法：上午10：00给予补阳方,晚上22：00给予补阴方。幼兔用药剂量按成人临床用量折算后的剂量进行灌胃,连续12周。测定不同光源的光谱参数。在实验周期内,取实验开始前、4周、8周、12周四个观察点进行体重测量、眼轴测量。4周、12周时进行血清多巴胺及视网膜多巴胺含量测定。第12周时取双侧眼球,分别行视网膜结构透射电镜观察、多巴胺受体(D2)的免疫组化检查。结果：4周、8周及12周时,LED灯组眼轴长度显著大于同时间自然光组、全光谱组,以及LED灯中药组(P<0.01,P<0.05),LED灯中药组眼轴长度与自然光中药及全光谱中药组差异无统计学意义。6组幼兔体重发育无显著差异。LED灯光谱主要集中在360-700nm,峰值波长在450 nm、550nm附近,含有紫光、蓝光和光谱能量较高的中波长光绿光,相对缺乏短波长紫外光和长波长光红光。全光谱灯光谱范围较宽,为380 nm-760nm,峰值波长约在600 nm附近,包含短波长紫外光、紫光,能量较高的中波长黄光和绿光和长波长光线红光。光谱范围接近自然光光谱范围。自然光光谱范围在380-760nm,峰值波长在490nm附近。LED灯组视网膜组织电镜下观察与自然光组有明显差别,主要体现在色素上皮层、光感受器和神经纤维层。全光谱组内可见脂质颗粒位于色素上皮细胞的细胞质中,但数量大小均不如LED灯组明显,对细胞膜、微绒毛改变较少,光感受器内、外节结构较清晰,排列尚整齐,神经纤维层存在少量空泡化现象,但较LED灯组程度轻。LED灯中药组和全光谱中药组光感受器内、外节结构基本清晰,排列整齐,外核层细胞形态规则,染色均匀,神经纤维层排列较为紧密,无空泡存在,但与全光谱中药组相比,LED灯中药组神经节细胞细胞核,形态欠规则。第4、12周时,LED灯组视网膜及血清中多巴胺显著低于其余5组(P<0.01)；自然光中药组、LED灯中药组、全光谱组及全光谱中药组视网膜及血清中多巴胺与自然光组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。第12周时LED灯组兔视网膜D2受体表达量显著低于其余5组(P<0.05,P<0.01),自然光中药组、LED灯中药组、全光谱组,以及全光谱中药组幼兔D2受体表达量无显著性差异(P>0.05)。LED灯中药组幼兔视网膜D2受体表达上调(P<0.01)。结论：LED灯造成屈光发育不正的原因可能是,光谱缺少紫外光谱段和红光段,造成发育中的幼兔眼轴延长,视网膜结构发生改变,视网膜及血清多巴胺分泌减少,视网膜D2受体表达下调。全光谱灯对眼轴发育的影响与自然光相似。而“日钟阴阳方”可通过多节点抑制LED灯造成的眼轴发育不良,对视网膜的结构具有一定的保护作用。