论文部分内容阅读
目的:检测精神分裂症患者白细胞和血浆中相同miRNAs的表达水平,验证出差异表达的miRNAs,以寻找出快速、灵敏、特异的生物标志物,建立精神分裂症的诊断模型,为精神分裂症的诊断、病情评估,治疗、预后及个性医疗提供可靠的实验室依据。方法:1.差异表达miRNAs的筛选和验证:筛选与精神分裂症有极大相关性的8种miRNAs。收集90例初诊精神分裂症(SZ),90例双相情感障碍(BPAD),90例健康对照者的全血,分别提取其白细胞和血浆,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测两类型样本中8种miRNAs的表达情况,使用SPSS20.0软件对miRNAs的表达差异进行统计学分析,以验证出差异表达的miRNAs,并分析白细胞和血浆同一miRNAs表达相关性。2.受试者工作曲线(ROC曲线):以精神分裂症作为病例组,非精神分裂症为对照组,对差异表达的miRNAs进行ROC曲线分析,初步评价miRNAs在精神分裂症中的诊断价值。3.诊断模型的建立:随机选取45例精神分裂症,90例非精神分裂症(45例双相情感碍和45例健康)作为训练样本,其余样本作为验证样本。经ROC曲线分析筛选出诊断价值较高的miRNAs,分别建立血浆和白细胞的决策树、人工神经网络和二元logistic回归分析三类miRNAs的诊断模型。结果:1.RT-PCR验证结果:用SPSS 20.0软件中非参数的Kruskal-Wallis检验(H检验)对三组样本进行分析并进行两两比较。在血浆样本中,miRNAs在精神分裂症与双相情感障碍组、健康对照组的比较中,除miR-31-5p(P>0.001)差异无统计学意义外,另外七种miRNAs:miR-99b-5p、miR-107、miR-134-5p、miR-487b-3p、miR-181b-3p、-miR-431-5p和miR-433-5p(P均<0.001),差异有显著统计学意义。在白细胞样本中,miRNAs在精神分裂症组与双相情感障碍组比较中,除miR-181b-3p(P>0.001)差异无统计学意义外,其余七种miRNAs:miR-31-5p、miR-99b-5p、miR-107、hsa-miR-134-5p、miR-487b-3p、miR-431-5p和miR-433-5p(P均<0.001)差异均有显著统计学意义;而在精神分裂症组与健康对照组比较中,除miR-433-5p(P>0.001)差异没有统计学意义外,其余七种miRNAs差异均有显著统计学意义。2.ROC曲线结果:用SPSS 20.0制作ROC曲线,进行ROC曲线下面积(AUC)分析,各指标AUC分别为:血浆miRNAs:miR-99b-5p(0.923)、miR-181b-3p(0.902)、miR-107(0.744)、miR-433-5p(0.741)、miR-431-5p(0.731)、miR-134-5p(0.715)和miR-487b-5p(0.689);白细胞miR-31-5p(0.931)、miR-487b-3p(0.887)、miR-99b-5p(0.869)、miR-431-3p(0.763)、miR-134-5p(0.756)和miR-107(0.721)4.诊断模型结果:1)决策树模型:血浆最优模型5验证样本准确率85.2%、敏感性97.8%、特异性78.9%;白细胞最优模型5验证样本准确率88.1%,敏感性77.8%,特异性93.3%。2)人工神经网络模型:血浆最优模型2验证样本准确率91.9%,灵敏度97.8%,特异性88.9%;白细胞最优模型6准确率92.6%,灵敏度86.7%,特异性95.6%。3)二元logistic回归模型:血浆最优模型验证样本准确率为90.4%,灵敏度95.6%,特异性87.8%。白细胞最优模型验证样本准确率88.9%,灵敏度80.0%,特异性93.3%。结论:1.精神分裂症患者血浆miR-107、miR-433-5p、miR-99b-5p、miR-134-5p、hmiR-487b-3p和miR-431-5p显著低表达,miR-181b-3p显著高表达;白细胞miR-31-5p、miR-107、miR-99b-5p、miR-134-5p、miR-487b-3p和miR-431-5p显著低表达,可作为早期诊断的生物标志物。2.双相情感障碍患者血浆miR-99b-5p,白细胞miR-134-5p和miR-433-5p存在显著差异表达,有潜能作为早期诊断的生物标志物的可能。3.建立诊断模型能提高miRNAs对精神分裂症的诊断价值。白细胞样本miRNAs比血浆miRNAs诊断价值更高。