基于β-防御素-2、SP-A等探索肉苁蓉对气管切开插管留置套管大鼠肺部免疫功能的影响

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目的:通过气管切开插管留置套管大鼠模型,检测肺部β-防御素-2(BD-2)、肺泡表面活性物质相关蛋白A(SP-A)及分泌型免疫球蛋白(SIgA)、血清白细胞介素2(IL-2)的水平,探讨肉苁蓉对气管切开插管留置套管大鼠肺部免疫功能的影响。方法:将54只SD雄性大鼠采用随机数字表法分为A组(正常对照组18只)、B组(气管切开插管留置套管模型组18只)、C组(模型+肉苁蓉干预组18只)。C组于造模后6h予肉苁蓉水煎剂灌胃2m1/次,每天两次;A、B组于相同时间予生理盐水灌胃2m1/次,每天两次。各组分别于用药后24h、72h、168h三个时段取材6只。取材时先通过腹主动脉采血2m1,通过IL-2ELISA试剂盒检测IL-2的浓度;结扎右主支气管并取右肺组织,其中100mg通过RT-PCT检测β-防御素-2的表达,余部分组织行病理切片观察肺组织损伤,用Smith评分法进行半定量分析;于左肺取肺泡灌洗液,应用SP-AELISA试剂盒检测SP-A浓度;用SIgA ELISA试剂盒检测SIgA浓度。结果:(1)A组肺组织病理切片结果正常,B组、C组大鼠24h、72h、168h时段均有不同程度的水肿、肺泡及间质炎症、出血、肺不张等肺组织损伤,Smith评分高于对应时段正常大鼠。C组三个时段评分与B组对应时段评分比较无明显差异。气管切开插管留置套管大鼠24h、72h、168h三个时段肺组织损伤程度不同,随着时间增加损伤程度不断加重,三个时段有明显差异。(2)大鼠肺组织BD-2 mRNA表达在气管切开插管留置套管后第24h明显升高,而后开始下降,在第72h明显降低,至第168h降到最低值。用药后其表达在第24h表达便开始明显升高,至第72h表达达到最高值,在第168h表达有所下降但仍明显高于气管切开插管留置套管模型组与正常对照组。(3)B组、C组大鼠肺泡灌洗液SP-A浓度在24h、72h、168h三个时段均明显高于对应时段正常对照组,以24h浓度最高,168h最低,呈随气管切开插管时间的延长而浓度不断降低的趋势,C组168h SP-A浓度高于B组。(4)大鼠肺泡灌洗液SIgA浓度在气管切开插管留置套管后第24h开始升高,至第72h达到峰值,随后逐渐下降,至第168h降到最低值但仍高于正常水平。用药后其表达在第24h开始升高,但同气管切开插管留置套管模型组相比差别不明显,至第72h表达达到最高值,在第168h表达有所下降但仍明显高于气管切开插管留置套管模型组与正常对照组。(5)大鼠血清IL-2含量在气管切开插管留置套管后没有变化。但用药后其含量在72h、168h升高。结论:气管切开插管留置套管可引发肺组织损伤,造成肺部免疫功能紊乱,早期BD-2、SP-A、SIgA可能因机体自我保护反应增高,随后逐渐下降,而肉苁蓉可提高肺部BD-2、SP-A、SIgA的表达而保护肺组织,同时可提高血IL-2浓度改善机体免疫。
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