紫菜多糖和龙须菜寡糖抗食物过敏性质的研究

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在过去的几十年中,食物过敏的发生率在全世界范围内逐年上升。食物过敏常常会引起皮肤、消化道和呼吸道等部位的病理反应,严重的还会威胁到患者的生命。目前,通过开发新型抗过敏天然活性物质来预防或治疗食物过敏正逐渐成为一个新的研究热点。紫菜多糖(porphyran)是一类存在于紫菜中的硫酸多糖,具有免疫调节的活性,并且能够预防和治疗自身免疫性疾病。龙须菜寡糖(Gracilaria lemaneiformis oligosaccharide)是通过菌株与龙须菜共培养直接制备的寡糖。目前关于紫菜多糖和龙须菜寡糖抗过敏方面的研究较少,所以探究紫菜多糖和龙须菜寡糖的抗食物过敏功效,并深入研究其抗食物过敏机理,对于开发新型原料药或功能性食品具有重要的意义。本研究通过水提、低压浓缩、醇沉、DEAE-cellulose52离子柱层析等方法获得高纯度紫菜多糖,其总糖含量为98.85%,3,6-内醚半乳糖含量为6.25%,硫酸根含量为14.26%,糖醛酸含量为14.02%,蛋白含量为1.2%。通过离子色谱鉴定其含有的单糖主要为半乳糖,含量为60.09%。通过发酵、超滤、Superdex Peptide HR10/300柱层析等方法获得高纯度龙须菜寡糖,其总糖含量为78.85%,还原糖含量为17.80%,蛋白含量为0.2%。通过离子色谱测定纯化的龙须菜寡糖中四糖含量为48.47%,六糖含量为25.69%。从拟穴青蟹中纯化得到原肌球蛋白(tropomyosin,TM),利用TM作为过敏原建立小鼠食物过敏模型,以评价紫菜多糖和龙须菜寡糖的抗过敏效果。动物实验结果显示,第二次腹腔注射TM后,TM组小鼠血清IgE的含量是PBS组的4-9倍,说明小鼠已致敏,而注射紫菜多糖和龙须菜寡糖后小鼠血清IgE和IgG1的水平均能显著降低, IgG2a的水平均能显著升高;第十次灌胃后,TM组小鼠粪便中组胺含量上升为187.48μg/mL,而紫菜多糖组小鼠粪便中组胺含量下降为32.49μg/mL,龙须菜寡糖组小鼠粪便中组胺含量下降为133.52μg/mL。细胞实验结果显示,紫菜多糖和龙须菜寡糖均能够显著抑制Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)水平,促进Th1细胞因子(IFN-γ,紫菜多糖还能促进IL-10的产生)的产生,紫菜多糖和龙须菜寡都能有效缓解空肠组织的过敏病理现象。紫菜多糖诱导IFN-γ的产生是通过JNK和JAK2两条信号通路途径。综上所述,紫菜多糖和龙须菜寡糖均能够显著降低小鼠血清特异性IgE和IgG1的水平,促进IgG2a的水平,能够促进Th1细胞因子的水平,抑制Th2细胞因子的水平,能有效缓解空肠组织的过敏病理现象。这些结果说明紫菜多糖和龙须菜寡糖能够有效调节辅助性T细胞的免疫功能向Th1细胞转换,使Th1、Th2细胞重新处于相对平衡状态,从而抑制Th2细胞主导的食物过敏反应。
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