猪源3型链球菌的分离鉴定及其荚膜多糖疫苗的研究

来源 :天津农学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lwj2005
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猪链球菌为一种有荚膜的革兰氏阳性球菌,可导致不同周龄、品种与性别的猪感染引发败血症、关节炎和呼吸困难等的一种人畜共患病。荚膜多糖是细菌的主要保护性抗原和毒力因子,具有较好的免疫原性,是最适宜做疫苗的细菌靶抗原之一。本试验为了了解猪链球菌的荚膜多糖是否对链球菌有免疫作用,从天津某猪场分离到一珠链球菌,经过16Sr RNA鉴定为3型猪链球菌,并且携带Srt A、orf2、Gapdh、abpb、Ssn A、Lmb、znu A、gdhgdh、epf、mrp等毒力因子。生长曲线显示该菌株在9h-10 h时生长达到峰值(log CFU=9.4);药敏试验结果表明分离株对阿莫西林、头孢类等敏感,对氟苯尼考、林可霉素等耐药;对小鼠表现强致病力,用最大致死量感染小鼠后48h内致死率达100%。对猪源3型进行荚膜多糖的粗提,用苯酚硫酸法测定粗提中3型荚膜多糖的含量为34.21%。用蛋白酶K、脱氧核糖核苷酸酶Ⅰ、核糖核苷酸酶A去除粗制多糖中的蛋白与核酸,达到蛋白含量为100ug/m L以下,核酸含量0.125mg/m L以下。冻干机冻干得到纯化后的荚膜多糖。40只昆明小鼠随机分成5组,用荚膜多糖溶液免疫小鼠,并且设定阳性对照组与空白对照组,其中阳性对照组用2、7型猪链球菌通用疫苗免疫,空白对照组肌肉注射PBS溶液。免疫两次后,进行攻毒。结果高浓度试验组保护率为75%,中浓度试验组免疫保护率为62.5%,低浓度试验组保护率为50%,阳性对照组保护率为37.5%,阴性对照组全部死亡。对全部小鼠进行病理组织学观察。目前流行于猪场的链球菌不仅仅有2型,而链球菌的防疫也是重中之重。本试验说明荚膜多糖疫苗可以给予一定的防护并且高于市面上的通用弱毒疫苗,为链球菌的防治做出了一定的贡献。
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