【摘 要】
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目的:以MCF-7细胞、转染空载体的MCF-7细胞、稳定转染M-CSF的MCF-7细胞为模型,探讨胞质M-CSF对人乳腺癌MCF-7细胞抗药性的影响及可能机制。方法:采用MTT及台盼兰染色法检测细
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目的:以MCF-7细胞、转染空载体的MCF-7细胞、稳定转染M-CSF的MCF-7细胞为模型,探讨胞质M-CSF对人乳腺癌MCF-7细胞抗药性的影响及可能机制。方法:采用MTT及台盼兰染色法检测细胞的存活率;高效液相色谱法检测细胞内药物浓度;RT-PCR鉴定耐药基因MDR1的表达;Western Blotting鉴定细胞耐药P-糖蛋白(P-gp)及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果:对照组转染空载体的MCF-7细胞(命名为MCF-7-C细胞)和MCF-7细胞与实验组转染M-CSF的MCF-7细胞(命名为MCF-7-M细胞)比较:MTT及台盼兰拒染实验显示细胞在阿霉素(Adriamycin, ADM)、紫杉醇(TAX)等药物的作用下MCF-7-M的存活率均高于对照组细胞(p<0.05),对照组之间无显著差异(p>0.05)。高效液相色谱实验显示:阿霉素同一药物浓度在实验组MCF-7-M细胞内的药物浓度明显少于对照组细胞(p<0.01);紫杉醇在对照组中均可测出,且组间差异无统计学意义(p>0.05),但实验组MCF-7-M细胞内由于药物浓度过低仪器未检测。RT-PCR实验显示MCF-7-M细胞的MDR1基因表达量较MCF-7-C细胞和MCF-7细胞高(p<0.01)。Western blot实验显示MCF-7-M细胞的Bcl-2、P-gp蛋白表达量高于MCF-7-C细胞和MCF-7细胞(p<0.01)。结论:胞质M-CSF能增加人乳腺癌MCF-7细胞对阿霉素和紫杉醇的抗性,降低细胞内阿霉素和紫杉醇的浓度;胞质M-CSF上调MCF-7细胞MDR1基因、P-gp和Bcl-2蛋白的表达。
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