蒺藜首乌汤治疗白癜风及蒺藜皂苷对黑素细胞的影响机制研究

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目的:1.观察蒺藜首乌汤治疗白癜风的临床疗效及其在白癜风治疗中的作用机制。2.揭示蒺藜首乌汤君药蒺藜的有效单体蒺藜皂苷(GSTT)对氧化应激损伤黑素细胞活力和凋亡的影响,为临床新药单体开发利用奠定理论基础。方法:1.收集100例经临床确诊的白癜风患者,进行临床分期、分型和中医症候分型,随机分为两组。治疗组采用蒺藜首乌汤口服,外用糠酸莫米松乳膏;对照组口服白癜风丸,外用糠酸莫米松乳膏。3个月为一疗程,研究结束后进行临床疗效判定。分别抽取治疗组、对照组患者治疗前后静脉血,进行血清CAT、GSH-PX、SOD、MDA水平检测,随机抽取本院体检中心同期50名健康体检者为健康对照组。2.以正常人黑素细胞为研究对象,进行传代培养。在培养的黑素细胞中加入250μmol/L H2O2作用12h,作为黑素细胞氧化应激模型。实验分为药物处理组、阴性对照组、阳性对照组。药物处理组分为50、100、150mg/L三个药物浓度。采用MTT法和Annexin-V/PI双染法观察不同浓度GSTT对体外培养的氧化应激损伤黑素细胞活力和凋亡的影响。结果:1.临床研究结果:(1)治疗组和对照组临床疗效比较两组痊愈率比较:治疗组痊愈率为44%,对照组痊愈率为12%,两组比较有统计学意义(χ2=6.349,P<0.05)。两组有效率比较:治疗组有效率为76%,对照组痊愈率为40%,两者差异具有统计学意义(χ2=6.650,P<0.05)。(2)治疗组和对照组不同中医证型疗效比较:风热证治疗组痊愈率明显高于对照组,两组比较具有统计学意义(χ2=4.773,P<0.05)。气滞血瘀证治疗组有效率高于对照组,经统计学分析,两者差异具有统计学意义(χ2=4.000,P<0.05)。(3)两组患者治疗前与健康对照组血清抗氧化酶水平比较两组患者治疗前血清CAT、GSH-PX、SOD水平较健康对照组明显降低,MDA则显著升高,经统计学分析,两组差异均有有统计学意义(P <0.001)。治疗组与对照组白癜风患者血清抗氧化酶水平比较,统计学分析两者之间差异无统计学意义(P>0.05)(4)治疗组患者治疗前后与健康对照组血清抗氧化酶水平比较治疗组患者治疗后血清CAT、GSH-PX和SOD水平较治疗前均有大幅度升高,而血清MDA水平明显下降,经统计学分析,两者差异均有统计学意义(P <0.001)。治疗组治疗后血清GSH-PX、MDA水平与健康对照组无统计学差异(P>0.05);血清SOD水平高于健康对照组,两者比较有统计学意义(P <0.05)。(5)对照组患者治疗前后与健康对照组血清抗氧化酶水平比较对照组患者治疗后血清CAT、GSH-PX和SOD水平均有大幅度升高,血清MDA水平明显下降,治疗前后经统计学分析,两者差异均有统计学意义(P <0.001)。MDA水平与健康对照组比较无统计学差异(P>0.05);SOD水平高于健康对照组,统计学分析,两者差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后CAT、GSH-PX水平仍低于健康对照组,经统计学分析,两者差异有统计学意义(P <0.001)。(6)治疗组与对照组患者治疗后血清抗氧化酶水平比较治疗组与对照组患者治疗后血清抗氧化酶水平比较,治疗组CAT、GSH-PX水平显著高于对照组,经统计学分析,两者差异有统计学意义(P <0.001),SOD与MDA相比较,无统计学意义(P>0.05)。2.实验研究结果:(1)不同浓度的蒺藜皂苷对氧化应激损伤黑素细胞活力的影响药物处理组中浓度组和高浓度组与阳性对照组比较无统计学意义(P>0.05),药物处理组中浓度组和高浓度组细胞活力与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),药物处理组的中浓度和高浓度组细胞活力比较有统计学意义(P<0.05),低浓度组对细胞活力影响与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。(2)不同浓度的蒺藜皂苷对氧化应激损伤黑素细胞凋亡的影响低浓度组与对照组比较无统计学意义,而中高浓度药物处理组与对照组黑素细胞早期凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05),高浓度药物处理组与中浓度药物处理组黑素细胞凋亡率比较也有统计学意义(P<0.05)。结论:1.蒺藜首乌汤治疗进展期白癜风疗效确切,无不良反应,抗氧化作用可能为蒺藜首乌汤治疗白癜风有效的作用机制。2. GSTT具有抗氧化作用,可增加氧化应激诱导下黑素细胞的活力,减少其凋亡,通过抗氧化作用起到对黑素细胞的保护作用。
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