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目的:阿霉素又称多柔比星（DOX）,是一种蒽环类抗生素,在临床上广泛用于多种恶性肿瘤的治疗。然而,阿霉素长期应用会诱发剂量依赖性心脏和肾脏毒性。目前研究表明,阿霉素引起的肾脏毒性与内质网应激、脂质代谢紊乱以及炎症有关,但其分子机制尚不清楚。本实验旨在研究脂肪酸结合蛋白4（FABP4）是否参与阿霉素引起的肾脏毒性过程,并对其机制进行探讨。方法:1.动物实验:选用SPF级BALB/c小鼠40只,雌性,体重18 g左右。适应性喂养后将小鼠随机分为四组:阴性对照（CON）组,阿霉素（DO X）组,荷瘤小鼠对照（4T1）组,荷瘤小鼠+DOX（4T1+DOX）组。将4T1乳腺癌细胞悬液注射至20只小鼠乳房下的脂肪垫处,待肿瘤成形后,DOX组和4T1+DOX组分别腹腔注射DOX,每次3 mg/kg,隔日一次,共计5次,累计剂量15 mg/kg;CON组和4T1组腹腔注射等体积生理盐水。给药结束一周后,采用肾脏超声造影测定肾脏的形态学改变及血流情况。次日解剖前禁食12小时,内眦取血并离心,分离血清,采用试剂盒法测定血清中尿素氮（BUN）和肌酐（Cre）的浓度。之后分别取出肿瘤组织和肾脏组织并称重。去除肾脏外面的结缔组织,一部分用多聚甲醛固定用于组织病理学观察和油红O染色观察肾脏组织内的脂质情况,一部分制成匀浆备脂质代谢组学测定,另一部分采用western blot技术检测肾脏组织中FABP4、PPAR-γ及BAX等蛋白水平。2.细胞实验:培养人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2）。待细胞生长到90%融合度时将细胞随机分为4组:分别是阴性对照（CON）组、DO X组、FABP4靶向抑制剂BMS309403组及BMS309403+DOX组。细胞于37℃、5%CO2细胞培养箱培养。采用CCK-8检测细胞活力,采用油红O染色检测细胞脂滴形成,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用we stern blot检测细胞中FABP4、PPAR-γ及BAX等蛋白水平。结果:一、整体实验1.动物一般状况:与CON组相比,DOX组小鼠体重降低（P＜0.01）。与4T1组相比,4T1+DOX组体重也明显降低（P＜0.01）,肿瘤体积生长较慢,肿瘤体重和体积均缩小（P均＜0.01）。2.血清生化指标:与CON组相比,DOX组血清中BUN和Cre水平均升高（P＜0.05）;与4T1组相比,4T1+DOX组血清中BUN水平升高（P＜0.05）,Cre水平未有明显差异。3.肾脏超声造影:与CON组相比,DOX组显示肾动脉阻力指数（R I）增大（P＜0.01）,肾脏血流收缩期峰值流速（PSV）降低（P＜0.05）;与4T1组相比,4T1+DOX组显示肾动脉阻力指数（RI）增大（P＜0.01）和肾脏血流收缩期峰值流速（PSV）降低（P＜0.05）。4.肾脏组织病理HE染色结果:CON组和4T1组肾脏组织排列紧密,细胞状态良好;DOX组和4T1+DOX组肾小管细胞大量空泡变性\肾小球萎缩及肾小球囊腔扩大。5.非靶向代谢组学:通过代谢组学将CON与DOX组以及4T1与4T1+DOX组进行差异化合物的筛选与鉴定,共筛选出71个差异化合物,鉴定出14个。将确认之后的差异代谢物导出,整理格式后于在线软件M etaboanalyst4.0和在线数据库KEGG中进行代谢物富集分析和潜在生物标志物的代谢通路分析得出甘油磷脂代谢是阿霉素引起小鼠肾脏损伤脂质代谢的关键通路。6.肾脏油红O染色结果:CON组和4T1组无脂质沉积,而DOX和4T1+DOX组均显示出不同程度的红色脂质沉积。7.免疫组织化学结果:与CON组相比,DOX组有大量阳性染色;与4T1组相比,4T1+DOX组也有大量阳性染色。并且显示FABP4主要定位于近曲小管上皮细胞中。8.Western blot结果:与CON组相比,DOX组FABP4、p-JNK及BAX蛋白水平均升高（P＜0.01）,PPAR-γ及BCL-2蛋白水平均降低（P均＜0.05）;与4T1组相比,4T1+DOX组FABP4、JNK及BAX蛋白水平均升高（P均＜0.01）,PPAR-γ及BCL-2蛋白水平均降低（P＜0.05）。二、体外细胞实验1.CCK-8细胞活力检测:DOX可浓度依赖性降低HK-2细胞存活力。BMS309403在低于50μM时对细胞活力未见明显影响;DOX与BMS309403联合给药后,可对DOX所致的细胞存活力降低有明显的缓解作用。2.细胞油红O染色结果:与CON组相比,DOX组细胞内有大量红色脂质沉积,BMS309403组未见脂质沉积,而BMS309403+DOX组可见脂质沉积,但较DOX组减轻。3.流式细胞术检测细胞凋亡:对照组早期凋亡细胞占总细胞数5.42%,DOX组相较于对照组早期凋亡细胞占总细胞数升高（12.2%）,BM S309403组早期凋亡细胞占总细胞数5.01%,与对照组无明显差异;BMS309403+DOX组较DOX组相比,早期凋亡细胞占总细胞数降低（7.08%）。4.Western blot结果:与CON组相比,DOX组FABP4、p-JNK及B AX蛋白水平升高（P＜0.05）,BMS309403组FABP4蛋白水平较CON组明显降低（P＜0.01）,其他蛋白无明显差异。BMS309403+DOX组和DOX相比,FABP4、p-JNK及BAX蛋白水平均降低（P＜0.05）。结论:1.阿霉素对正常小鼠和荷瘤小鼠均能引起肾损伤,并且肾脏损伤过程与脂质代谢紊乱和细胞凋亡有关。2.阻断FABP4可减轻阿霉素所致的HK-2细胞损伤,这一作用和其可降低脂质代谢紊乱及细胞凋亡有关。