【摘 要】
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百合和玉竹同属百合科,二者作为传统中药药材具有悠久历史。百合和玉竹多糖具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤及降血糖等多种生物学活性。目前对百合和玉竹多糖的研究主要集中在多糖提取工艺优化及中性糖的结构分析与生物活性方面,对百合和玉竹果胶多糖的精细结构及其生物学活性关系的研究并不深入。本文以百合和玉竹为研究对象,分离纯化出百合和玉竹果胶均一级分,对比分析二者在结构及体外抗氧化活性的异同,探讨二者结构特点与抗氧
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百合和玉竹同属百合科,二者作为传统中药药材具有悠久历史。百合和玉竹多糖具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤及降血糖等多种生物学活性。目前对百合和玉竹多糖的研究主要集中在多糖提取工艺优化及中性糖的结构分析与生物活性方面,对百合和玉竹果胶多糖的精细结构及其生物学活性关系的研究并不深入。本文以百合和玉竹为研究对象,分离纯化出百合和玉竹果胶均一级分,对比分析二者在结构及体外抗氧化活性的异同,探讨二者结构特点与抗氧化活性之间的构效关系。本论文研究结果如下:通过水提醇沉法从百合和玉竹茎中提取得到百合总糖WLBP及玉竹总糖WPOP,二者单糖组成主要包括葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）、半乳糖（Gal）和半乳糖醛酸（Gal A）。采用DEAE-Cellulose阴离子交换层析对WLBP和WPOP进行分离,获得百合果胶WLBP-A（得率为10.7%）和玉竹果胶WPOP-A（得率为12.5%）。采用离子交换层析和凝胶过滤层析对WLBP-A和WPOP-A进行系统分级,分别得到电荷与分子量分布均一的果胶级分WLBP-A3-c和WPOP-A-c,二者主要由Gal A、Rha、Gal和Ara构成,其中Gal A含量最高,TBA显色均呈阳性,推测含有RG-II型果胶结构域。利用酶解法、化学法及仪器分析法对百合和玉竹果胶均一级分WLBP-A3-c和WPOP-A-c进行结构分析,结果表明二者均由RG-I、RG-II及HG型结构域组成,在WLBP-A3-c和WPOP-A-c中不同果胶结构域所占质量比不同,二者中RG-I/RG-II/HG的比值分别为17.2:6.8:76.0和10.6:12.6:76.8。通过甲基化分析、核磁共振波谱扫描分析等多种方法对两种RG-I型果胶（WLBPA3-c-DE1和WPOP-A-c-DE1）进行结构解析。二者主链均由[→2)-α-L-Rhap-（1→4）-α-D-Galp A-(1→]二糖重复单元连接而成,在主链Rhap的O-4位连有中性糖侧链,为典型的RG-I型结构域。二者主链分支度分别为80.9%和57.1%,中性糖侧链均包括阿拉伯聚糖、半乳聚糖或AG-I和AG-II型果胶侧链四种类型。二者相比,WLBP-A3-c-DE1中半乳聚糖和AG-I型侧链比例较高,WPOP-A-c-DE1中阿拉伯聚糖和AG-II型侧链占比较高。通过DPPH·、OH·和ABTS+三种不同的自由基体外清除体系测定了百合和玉竹均一级分及其结构单元的抗氧化活性。结果显示,在不同自由基清除体系中清除活性均表现出WPOP-A-c＞WLBP-A3-c的趋势。构效关系表明:分子量较小的WPOP-A-c自由基清除能力更大,但分子量并不是影响抗氧化能力的主要因素,果胶的单糖组成仍发挥着重要作用,其中,Gal A含量较高的WPOP-A-c抗氧化能力更强。WLBP-A3-c和WPOP-A-c的自由基清除能力是其不同结构域协同作用的结果。其中,HG结构域发挥了最强的抗氧化活性（HG寡糖片段的抗氧化活性优于Gal A单体）,其次为RG-II结构域,分子量较大、Gal A含量低及中性糖侧链较多的RG-I结构域的抗氧化活性最低。综上所述,本论文对百合和玉竹果胶多糖进行了系统的结构分析和抗氧化活性研究,并对二者发挥抗氧化活性的构效关系进行了初步探讨。研究结果丰富了百合和玉竹果胶的结构和功能信息,为百合和玉竹多糖类药物开发提供了理论依据。
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