【摘 要】
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目的:通过对胃癌细胞系中侧群细胞的检测、分选及生物学特性的初步鉴定,探讨以侧群细胞作为胃癌干细胞研究切入点的可行性。方法:选择3株不同分化程度的人胃癌细胞系MKN-28、
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目的:通过对胃癌细胞系中侧群细胞的检测、分选及生物学特性的初步鉴定,探讨以侧群细胞作为胃癌干细胞研究切入点的可行性。方法:选择3株不同分化程度的人胃癌细胞系MKN-28、SGC-7901、BGC-823,以Hoechst33342/碘化丙啶(PI)荧光染料双染,维拉帕米拮抗对照,应用流式细胞仪荧光激活细胞分选法检测其侧群细胞比例;选择MKN-28细胞系进行侧群细胞分选,并通过细胞生长曲线(CCK-8法)、平板克隆形成试验对其体外增殖和不对称分裂能力等生物学特性进行初步鉴定。结果:(1)3株细胞系中均存在一定比例的侧群细胞,比例在0.8%-2.7%之间。(2)侧群细胞比例与胃癌细胞系分化程度有关,分化越差的细胞系其侧群细胞比例越低(P=0.023)。(3)细胞生长曲线(CCK-8法)显示,人胃癌细胞系MKN-28的侧群细胞体外增殖能力明显强于非侧群细胞及未经分选的MKN-28细胞(P=0.044)。(4)人胃癌细胞系MKN-28的侧群细胞平板克隆形成能力明显强于非侧群细胞及未经分选的MKN-28细胞(89.33%±6.11%vs 13.33%±1.16%vs42.67%±6.43%,P=0.026)。(5)人胃癌细胞系MKN-28分选获得的侧群细胞亚群经体外培养2周后可扩增产生侧群细胞(1.4%)及非侧群细胞(98.6%),而非侧群细胞亚群经体外培养2周后仅产生比例极低的侧群细胞(0.1%)。结论:胃癌细胞系中存在比例相对稳定的侧群细胞,分化越差的细胞系其侧群细胞比例越低。胃癌侧群细胞体外增殖和克隆形成能力均明显强于非侧群细胞,并具有不对称分裂能力,可作为胃癌干细胞研究的切入点。
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