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酱油是我国的传统调味品,长期以来,酱油只是单纯作为调味品,随着人们生活水平的提高,要求酱油不仅具有调味品功能,还应该具有功能性和保健性。而目前市场上酱油产品相对单一,保健酱油较少。螺旋藻不仅蛋白含量高,可作为酱油酿造的蛋白质原料,而且还含有多种活性物质,可提高酱油的保健功能,所以开发螺旋藻酱油有一定的经济及研究价值。本论文系统研究了单菌株制曲酶系各酶活力的变化特点,研究了影响制曲的各个因素,并在此基础上对螺旋藻酱油的生产工艺进行了研究,为工业大规模生产高品质的螺旋藻保健酱油提供参考。研究内容与结论如下:(1)以中性、酸性、碱性蛋白酶、氨肽酶、淀粉酶、纤维素酶为指标,研究了单菌株制曲酶系各酶活力的变化特点,研究发现,沪酿3.042产酶系较为丰富,除酸性蛋白酶活相对较低外,所检测其他酶都有较高酶活,且大于生产所用米曲霉C;黑曲霉3.350有较强的产酸性蛋白酶能力、淀粉酶及纤维素酶能力,但其产中性及碱性蛋白酶能力弱。(2)以沪酿3.042为制曲菌株,通过单因素考察了原料配比、加水量、蒸料时间、制曲温度对制曲过程各类酶活力的影响规律。试验结果显示:原料配比可影响曲霉培养基的营养和通风性,从而影响曲霉生长,实验中豆粕:麸皮=2:3时酶活较高;适宜的水分有利于曲霉生长,实验得到的适宜加水量是120%;蒸料时间对制曲过程的影响主要体现在,蛋白质的适度变性有利于曲霉的生长,过度变性则会使酶活下降,在实验室条件下121℃,高压灭菌20min即可;制曲温度,过高不利于蛋白酶的积累,太低不利于曲霉生长,试验中选择30℃较为适宜。(3)对双菌株组合制曲进行了研究,研究发现,菌株间抑制作用比较强,表现为酸性蛋白酶活前期有所提高,后期下降很快,最后酸性蛋白酶活并无明显提高,因此整体而言,双菌种制曲并无达到丰富酶系的效果。(4)采用均质法及超声波法对螺旋藻进行破壁,研究发现,均质法时,最佳的破壁条件为:提取溶液为氯化钙溶液,浓度为10mmol/L,料液比为1:10,循环处理次数为3次(每次2min)。超声波法时,最佳的破壁条件为:提取溶液为氯化钙溶液,浓度为10mmol/L,料液比为1:10,超声波功率为400W,破壁时间15min。两种提取方法藻胆蛋白相对溶出率都在70%以上。(5)添加2%螺旋藻,对制曲过程无明显影响,成曲各类酶活力较未加螺旋藻成曲相差不大;感官有所不同,成曲略带藻绿色,但无藻腥味。(6)发酵方式采用了高温、低温多菌种混合发酵两种方式,研究发现,采用低温发酵效果较好,前期的低温可防止细菌的繁殖,防止pH下降,有利于中性、碱性酶活发挥作用,酶活也可保持较长时间,游离态氨基酸含量也较高,90d时可达到0.853g/100ml。就成品而言,低温发酵成品鲜味更加突出,酱香及酯香浓郁,可达到特级酱油标准,因此低温发酵具有更多优点,虽然发酵周期较长,但品质高,可作为螺旋藻酱油生产的工艺。