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研究背景及目的： 缺血性脑卒中是最常见的急性脑血管疾病，具有很高的发病率和致死率，其特点是阻塞血管从而诱发炎症反应、细胞凋亡和氧化应激等。脑卒中时，星形胶质细胞（AS）在神经元的保护、修复以及微环境的调整等方面发挥着重要的作用。 急性缺氧会诱发内质网应激反应（ERS），导致未折叠蛋白质反应(UPR)介导细胞凋亡和炎症反应，PERK/eIF2alpha、ATF6和IRE1途径均能影响下游的信号分子Caspase-12和GRP78的表达，间接地促进细胞凋亡，导致细胞死亡。在急性缺氧的早期大脑皮质可释放IL-6诱发炎症反应，影响JAK/STAT信号通路的表达进一步加重脑组织损伤。有研究指出JAK2/STAT3信号通路参与了缺氧后的级联反应，它可抑制氧化应激、干扰呼吸电子传递链保护线粒体，减少细胞损伤。但是，JAK2/STAT3信号通路与内质网应激之间是否存在关联及可能机制？因此，如果能揭示该信号通路与内质网应激之间的关系及机制，将为临床处理和治疗急性脑缺血提供新的理论依据。 乌司他丁（UTI）被广泛应用于各种炎症性疾病，具有器官保护的作用。在我们前期的动物与临床研究中也发现UTI有减轻脑缺血再灌注损伤作用，在脑缺血后再灌注前给予乌司他丁静脉注射，能上调脑皮质p-Akt的表达，降低8-OHdG的含量，提示乌司他丁减轻脑缺血再灌注损伤与激活PI3K-Akt信号通路及抗氧化应激作用有关。为进一步探讨乌司他丁对减轻内质网应激作用及机制，本研究通过制备AS糖氧剥夺模型，给予乌司他丁预处理，观察AS的形态学变化、内质网应激蛋白及JAK2/STAT3信号通路蛋白的表达情况，探讨UTI在急性缺氧时对AS的影响及可能机制。 方法： 从SD新生大鼠中提取原代AS，纯化后进行GFAP鉴定，其纯度大于90％时进行实验。观察不同缺氧时间对细胞活性的影响，以选取AS糖氧剥夺合适时间。随机将AS分成4组:(1)对照组（C组）:AS于正常条件下培养10h，不做处理；（2）缺氧组（I组）：AS糖氧剥夺10h；（3）乌司他丁组（U组）：AS在糖氧剥夺前予以UTI预处理24h后，糖氧剥夺10h；（4）AG490+乌司他丁组（U+A组）：AS在糖氧剥夺前予以AG490预处理24h后给予UTI处理24h，再行糖氧剥夺10h。每组细胞分别用MTS测定细胞活性，荧光探针观察ROS的变化，免疫组化测定caspase-3表达，ELSIA测定各组细胞上清液中IL-6含量，Western Blot法检测内质网应激蛋白GRP78、caspase-3、caspase-12及JAK2/STAT3信号通路蛋白的表达情况。 结果： 1.各组AS细胞活性OD值比较 C组细胞OD值最大（P＜0.05）；与I组比较， U组的细胞OD值升高10.3%（P＜0.05）；与I组、U组比较，U+A组细胞OD值均降低（P＜0.05）。 2.各组细胞caspase-3的表达比较免疫荧光强度分析及Western-Blot显示， C组caspase-3蛋白表达最少（P＜0.05）；与I组比较，U组、A+U组caspase-3蛋白表达均减少（P＜0.05）；与U组比较，A+U组caspase-3蛋白表达增加（P＜0.05）。 3.各组细胞荧光探针检测ROS含量 C组ROS含量最少（P＜0.05）；与I组比较， U组ROS含量减少（P＜0.05）；与U组比较，A+U组ROS含量增加（P＜0.05）。 4．各组细胞IL-6的表达 C组IL-6含量最少（P＜0.05）；与I组比较，U组IL-6的含量减少（P＜0.05）；与U组比较，U+A组IL-6的含量增加（P＜0.05）。 5．各组细胞caspase-12、GRP78的表达 C组caspase-12蛋白表达最少（P＜0.05）；与I组比较， U组caspase-12表达减少（P＜0.05）；与U组比较，U+A组caspase-12表达增加（P＜0.05）。I组GRP78蛋白表达最少（P＜0.05），U组GRP78蛋白表达最多（P＜0.05）；U+A组GRP78蛋白表达比U组少（P＜0.05），但较I组多（P＜0.05）。 6.各组细胞JAK2/STAT3相关蛋白的表达 I组P-JAK2蛋白表达最少（P＜0.05）， U组P-JAK2的表达较其增加（P＜0.05）；与U组比较，U+A组P-JAK2蛋白表达减少（P＜0.05）。C组P-STAT3蛋白表达最多（P＜0.05），U+A组中P-STAT3蛋白表达最少（P＜0.05）。与I组比较，U组中P-STAT3蛋白表达增加（P＜0.05）。与U组比较， U+A组中P-STAT3蛋白表达减少（P＜0.05）。 结论： 1.在星形胶质细胞缺氧前予以1000U/ml的乌司他丁预处理，能减少细胞的损伤，减少IL-6及ROS的产生，提示乌司他丁细胞保护作用与抑制氧化应激、减轻炎症反应有关系。 2.在急性缺氧时，乌司他丁可通过抑制内质网应激，上调GRP78表达的水平，从而抑制caspase-12、caspase-3的表达，抑制凋亡，减轻星形胶质细胞的损伤。 3.急性缺氧时，乌司他丁可影响JAK/STAT信号通路的表达，提示其对该信号通路作用与抑制内质网应激有关。