凹凸棒石负载姜精油的制备、表征与抗菌活性

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong536
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本论文以凹凸棒石为载体,制备凹凸棒石负载姜精油复合物。应用单因素和响应面试验设计方法,确定凹凸棒石负载姜精油的最佳试验工艺条件,并通过一系列表征对凹凸棒石负载姜精油复合物的性质进行研究。利用体内和体外抗菌试验研究复合物对金黄色葡萄球菌的抑制作用,并从分子水平研究其抑菌机理。主要的研究内容及结果如下:1、凹凸棒石负载姜精油的制备:凹凸棒石用作姜精油的载体,成功制备凹凸棒石负载姜精油复合物。通过单因素试验和响应面试验,对制备凹凸棒石负载姜精油复合物的反应条件进行优化。反应的最佳条件为:反应时间为150.44min,6-姜酚初始浓度为214.11mg·mL-1,反应温度为80.56℃,所得复合物负载6-姜酚的比率为0.93763%。2、凹凸棒石负载姜精油复合物的表征:通过傅里叶红外光谱仪、X射线光电子能谱仪、X射线衍射仪、同步热分析仪、场发射扫描电子显微镜对凹凸棒石负载姜精油复合物的性质进行分析。红外光谱和X射线光电子能谱分析结果表明凹凸棒石已经负载姜精油;X射线衍射分析表明姜精油以物理吸附的方式被吸附在凹凸棒石表面上,并未进入凹凸棒石的晶格;热失重分析再次证实了凹凸棒石成功负载姜精油,并且估算出凹凸棒石负载姜精油复合物中姜精油所占比率约为18.66%;场发射扫描电子显微镜观察结果表明凹凸棒石负载姜精油后形态发生明显的变化;分散性分析表明凹凸棒石负载姜精油后实现了有机化,复合物的性质发生了变化,凹凸棒石负载姜精油复合物具有明显的疏水性和亲油性。3、凹凸棒石负载姜精油复合物的体外抗菌性能研究:通过二倍稀释法,测得凹凸棒石负载姜精油复合物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3.5625 mg·ml-1,姜精油与凹凸棒石结合后,姜精油表现出更强的抗菌性能。复合物在细菌生长的延缓期和对数期均有较强的抑制细菌生长的作用。革兰氏染色实验表明凹凸棒石负载姜精油复合物抗菌性能具有靶向性,复合物很好的结合了凹凸棒石的吸附细菌能力和姜精油的抗菌能力。同时姜精油以凹凸棒石作为载体,姜精油的耐热性、耐候性、时效性和耐酸碱性得到明显提高。凹凸棒石负载姜精油复合物的体内抗菌性能研究:通过皮下注射金黄色葡萄球菌建立昆明小鼠皮肤感染模型。试验小鼠分为6组:正常对照组、模型组(甘油)、阳性对照组(百多邦)、姜精油组、凹凸棒石负载姜精油复合物低剂量组和高剂量组,连续给药七天。结果表明,小鼠涂抹凹凸棒石负载姜精油复合物后的皮损面积减小,皮肤评分优于模型组和姜精油组,体重逐渐恢复,皮肤病理组织学观察表明细胞核的排列趋于规整,炎性细胞浸润程度得到改善,并且毛细血管的扩张现象减缓。凹凸棒石负载姜精油复合物对金黄色葡萄球菌所引起的皮肤感染症状具有缓解、改善和治疗的作用,并且相对于姜精油而言,凹凸棒石负载姜精油复合物的效果更佳,起效时间更短。5、对凹凸棒石负载姜精油复合物抑菌作用的分子机理研究:检测金黄色葡萄球菌感染小鼠皮肤组织的炎症相关基因Toll样受体2(Toll-like receptor 2, TLR-2)、 Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR-4)、白介素1β(interleukin-1β, EL-1β)、肿瘤坏死因子a (Tumor Necrosis Factor alpha, TNF-a)基因的表达。发现经凹凸棒石负载姜精油复合物治疗后,TLR-2、TLR-4、IL-1β、TNF-α基因表达量均有所降低。凹凸棒石负载姜精油复合物可以降低金黄色葡萄球菌感染所致的炎性细胞因子升高,从而对由于金黄色葡萄球菌感染导致的皮肤炎症具有缓解作用。综上所述,凹凸棒石负载姜精油复合物在我们实验室被成功的制备。凹凸棒石负载姜精油复合物结合了凹凸棒石对细菌的吸附能力和姜精油的抗菌能力,并具有较强的耐热性、耐候性、时效性和耐酸碱性。对金黄色葡萄球菌有显著的体内体外抑制作用,对由金黄色葡萄球菌感染导致的皮肤炎症具有缓解作用。凹凸棒石负载姜精油复合物在新型天然抗菌复合物方面表现了巨大的潜力。
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