目的:初步探讨人腺病毒36型(adenvirus type 36,Ad36)在诱导3T3-L1前脂肪细胞棕色化过程中的作用。方法:(1)对MDI诱导组(对照组)和MDI+Ad36诱导组(实验组)第0、2、4、6、8天细胞进行BODIPY染色,观察细胞成脂情况。(2)分别收取对照组与实验组第0、2、4、6、8天细胞,利用实时荧光定量PCR检测两组棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体氧化磷酸化相关基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA表达水平变化;Western blot检测两组上述基因的蛋白质表达水平变化。(3)使用mTOR的抑制剂雷帕霉素后,BODIPY染色检测细胞成脂情况;实时荧光定量PCR与Western blot检测各组棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体氧化磷酸化相关基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA与蛋白质表达水平变化。结果:(1)在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,MDI诱导组细胞内脂滴逐渐增多并汇集,而MDI+Ad36诱导组细胞内脂滴先增多、汇集,在细胞分化的第4天加入Ad36后,与对照组相比,细胞内脂滴大小逐渐减小。(2)实验组细胞分化至第6、8天时,pgc1α、ucp1、fgf21、atp5o、cox5b、nd2 mRNA与蛋白质表达水平都明显高于对照组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)使用mTOR的抑制剂雷帕霉素后,细胞内大脂滴向小脂滴转化的能力明显减弱;棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体氧化磷酸化相关基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA与蛋白质表达水平都明显降低,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:Ad36可能通过mTOR上调pgc1α的表达,并进一步使ucp1、fgf21、atp5o、cox5b、nd2的基因表达水平升高,加快甘油三酯的分解与线粒体氧化磷酸化,最终使3T3-L1前脂肪细胞棕色化。