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目的:通过优化建立气滞血瘀型慢性输卵管炎大鼠模型,并在此基础上的TGF-β1诱导的成纤维细胞纤维化模型中观察膈下逐瘀汤加减方对由TGF-β1/MAPK信号通路介导的输卵管纤维化的影响,进而探讨膈下逐瘀汤加减方对气滞血瘀型慢性输卵管炎的作用机制。方法:第一部分:32只雌性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、常规模型组与病证复合模型组,空白组作为正常对照组,不给予任何手术操作或刺激;常规模型组向麻醉后的大鼠输卵管局部注入已配制好的金黄色葡萄球菌;假手术组操作流程同常规模型组,但输卵管局部不注入菌,以等量无菌生理盐水代替;病证复合模型组,常规注菌造模结束后 1 周开始肾上腺素皮下注射,浓度为 0.08 mL/100g体重,每日1次,共7日,7日后给予声、光、电+夹尾刺激3周,建立病证复合模型。实验第29日,对各组大鼠进行气滞血瘀症候积分评分;腹主动脉取血行血液流变学检测;输卵管形态学评分;HE染色观察输卵管病理学形态、MASSON染色观察纤维化水平。第二部分:小鼠胚胎成纤维细胞（NIH-3T3）分为空白对照组、TGF-β1刺激组（模型组）、膈下逐瘀汤加减方含药血清组、p3 8MAPK通路抑制剂组、膈下逐瘀汤加减方含药血清+p3 8MAPK通路抑制剂组。除空白组外,其余4组均通过10 ng/mL TGF-β1诱导12小时构建纤维化模型。含药血清组、抑制剂组、含药血清+抑制剂组在模型复制前分别给予相应的药物预处理6 h,具体方法如下:含药血清组给予膈下逐瘀汤加减方含药血清 1μ g/mL、抑制剂组给予SB203580 10 ng/mL、含药血清+抑制剂组给予上述两种等浓度的药物,模型组、空白组不予药物。模型复制结束后,通过 MTT法检测24h、48h、72h各组成纤维细胞OD值,绘制增殖曲线并进行比较;流式细胞术检测细胞的凋亡水平;激光共聚焦测定 α-SMA、p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1 蛋白的表达。第三部分:100只雌性SD大鼠随机分为5组:空白组、病证复合模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,空白组作为正常对照组,不予任何操作,其余4组造模方法同“第一部分”。中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组分别于造模第29天开始每天上午对模型大鼠灌胃治疗:膈下逐瘀汤加减方浓缩干粉加蒸馏水配制成浓度不同的混悬液,依次为0.3 8g/mL、0.7 5 g/mL、1.50g/mL,灌胃剂量按照 2mL/100g体重给药;病证复合模型组以等量蒸馏水灌胃,每次1日,连续给药4周。实验第57天对全部大鼠取材,观察大鼠全血黏度 3.0、血浆黏度,气滞血瘀证症候积分,HE染色观察输卵管病变、Masson染色观察胶原纤维等指标;酶联免疫（Elisa）法检测大鼠血清中TGF-β1、IL-1β的水平;Elisa法检测大鼠输卵管组织中 SOD、MDA、COL-1、MMP-9、TIMP-1的水平;免疫组化法检测大鼠输卵管组织中MMP-9、TIMP-1的水平;免疫荧光法检测大鼠输卵管组织中 p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1的水平;蛋白印迹（WB）法检测大鼠中α-SMA、p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1蛋白的表达;RT-PCR法检测大鼠输卵管组织中 α-SMA、p38MAPK、TGF-β1、COL-1、MMP-9、TIMP-1 的 mRNA的表达水平。结果:第一部分:1.各组大鼠造模后气滞血瘀证总积分、全血黏度3.0、血浆黏度等指标的组间比较,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。2.Masson染色结果显示:病证复合模型组可见明显蓝色胶原纤维,且比常规模型组颜色深,胶原纤维面积的比较中,与假手术组相比,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。第二部分:1.膈下逐瘀汤加减方含药血清能抑制成纤维细胞的增殖,与模型组比较,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。2.膈下逐瘀汤加减方含药血清能促进成纤维细胞的凋亡,与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。3.膈下逐瘀汤加减方含药血清降低成纤维细胞中 α-SMA、p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1 的荧光强度。第三部分:1.中、高浓度的膈下逐瘀汤加减方能降低慢性输卵管炎大鼠气滞血瘀证总积分,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。2.膈下逐瘀汤加减方能降低大鼠血液流变学中全血黏度3.0、血浆黏度,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。3.膈下逐瘀汤加减方能下调前炎症因子TGF-β1、IL-1β在血清中的表达,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。4.膈下逐瘀汤加减方能上调S OD、下调MD A在大鼠输卵管组织中的表达,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。5.膈下逐瘀汤加减方能下调 COL-1在大鼠输卵管组织中的表达,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。6.膈下逐瘀汤加减方能上调 MMP-9、MMP-9/TIMP-1,下调TIMP-1在大鼠输卵管组织中的表达,差异有统计学意义（P<0.05）。7.膈下逐瘀汤加减方能下调α-SMA、p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1 蛋白在大鼠输卵管组织中的表达,差异有显著的统计学意义（P<0.01）。8.膈下逐瘀汤加减方能下调 α-SMA、p38MAPK、TGF-βl、COL-1、TIMP-1的RNA在大鼠输卵管组织中的表达,差异有显著的统计学意义（P<0.01）;膈下逐瘀汤加减方能上调 MMP-9 RNA在大鼠输卵管组织中的表达,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.运用金黄色葡萄球菌经输卵管局部注射联合声、光、电+夹尾刺激+肾上腺素皮下注射法可优化建立气滞血瘀型慢性输卵管炎性大鼠模型,同时通过组织形态、病理生理相关指标检测,证实模型构建成功。2.膈下逐瘀汤加减方含药血清能够通过下调TGF-β1/MAPK信号通路相关蛋白的表达,进而抑制成纤维细胞的增殖,促进细胞的凋亡,改善成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。3.膈下逐瘀汤加减方可能通过降低气滞血瘀型慢性输卵管炎大鼠组织中的氧化应激及炎症反应,下调TGF-β1/MAPK信号通路相关蛋白的表达,减少胶原蛋白的沉积,减轻输卵管纤维化的程度。