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胚珠发育和雌配子体形成过程中遗传控制分子机理研究的材料主要来源于对突变体的发现和诱导。我国辽宁兴城油松种子园油松28号无性系嫁接树，雌配子体由于游离核有丝分裂停止，导致胚珠败育，因具有稳定的遗传特性，成为研究木本植物胚珠发育调控机制的极好材料。本文是国家自然科学基金<油松胚珠发育过程中基因表达特征的研究>(30371144)和<油松雌配子体游离核有丝分裂的分子调控机制>(30671655)资助项目的部分研究内容，以油松28号不育系胚珠为材料，油松14号可育系胚珠为对照，通过苯酚法、茚三酮法和考马斯亮蓝法等实验方法，借助于细胞组织学观察和SDS-PAGE电泳技术，研究了雌配子体发育阶段两系胚珠，经氮、磷、钙、蔗糖、NAA和6-BA等处理后的两系胚珠及由两系胚珠诱导的悬浮培养细胞游离氨基酸、可溶性糖和蛋白质含量的变化，氮、磷、钙、蔗糖、NAA和6-BA等对两系悬浮细胞细胞分裂的影响及蛋白质表达的变化，并通过双向电泳数据库检索了两系胚珠特异表达的蛋白质，结果表明：油松不育系胚珠败育可能是由于胚珠贮存和获得的氮、磷、钙、蔗糖、NAA和6-BA等较少及比例不协调，影响了胚珠内可溶性糖、游离氨基酸和可溶性蛋白质在不同发育时期含量的变化，导致游离氨基酸、可溶性糖和蛋白质代谢紊乱，表现出随胚珠的发育，可溶性糖含量下降，游离氨基酸积累，可溶性蛋白质降解的衰老机制，致使生长发育必需物质的输入和输出阻断，影响了雌配子体游离核的有丝分裂，阻碍胚珠正常发育，导致败育的发生。而可溶性糖、游离氨基酸和可溶性蛋白质含量的变化可作为本实验研究胚珠发育的生化指标。氮、磷、钙、蔗糖、NAA和6-BA等对由两系胚珠诱导悬浮细胞内可溶性糖、游离氨基酸、可溶性蛋白质含量变化的影响表现出相对稳定的遗传性。营养物质以氮、磷、钙、蔗糖，植物激素以6-BA、NAA的大小顺序对两系细胞细胞分裂起抑制作用，25.4、36.8、36.9和42.2KDa多肽可能与不育系胚珠游离核停止分裂有关，而56.6和80.7KDa多肽可能与细胞周期调控有关。从数据库检索鉴定两系胚珠特异蛋白质表达的结果来看，油松不育系胚珠败育可能由于胚珠缺乏保护酶系统，导致胚珠细胞的膜脂过氧化及生物大分子损伤，破坏了细胞的结构和功能，同时伴随着乙烯的生成，但不育系胚珠GAs的合成量下降。由于胚珠较可育系存在较少量糖酵解必需的酶，加之碳源短缺可能激发糖原异生过程，使胚珠生长发育所需中间产物减少及能量短缺。缺乏Ser／Thr激酶和Ca~+／CaM的信号转导系统，在控制细胞程序化死亡信号转导的半胱氨酸蛋白酶等上述因素的共同作用下，使胚珠生理生化功能紊乱，导致了胚珠发育停止。上述实验结果为进一步在生理生化基础上研究油松胚珠发育机理提供了参考，为在细胞周期水平上研究油松胚珠在游离核时期停止有丝分裂的原因提供实验材料。