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目的:探讨缺血性脑卒中后双蓣调脂汤药物干预脑损伤的减轻和神经功能的恢复的可能机制,为从化浊法入手的治疗缺血性脑卒中的这一特色研究及临床运用提供新的实验支持。
方法:建立了大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型。本研究采用高、低剂量双蓣调脂汤或丁苯酞灌胃给药对大鼠MCAO模型进行干预。采用横木行走实验(BWT)评估各组大鼠神经功能恢复情况;采用HE染色法观察梗死区脑组织的病理变化;Nissl染色法观察梗死区神经元的变化;TUNEL法观察梗死区细胞凋亡情况;采用RT-PCR技术、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光检测神经突生长抑制因子A(Nogo-A)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)、Nogo受体(NgR)、蛋白激酶C(PKC)、RhoA的mRNA或蛋白的相对表达量;采用免疫酶联方法(ELISA)测定血清中TNF-α、IL-6的蛋白表达变化。
结果与结论:根据研究结果表明,双蓣调脂汤药物干预后MCAO模型大鼠神经功能缺损程度改善,外周炎性反应和凋亡细胞减少。进一步的研究表明,双蓣调脂汤能显著降低Nogo-A、MAG、OMgp和NgR的表达,下调PKC/RhoA信号通路的表达水平。且双蓣调脂汤减轻MCAO模型大鼠的脑损伤的作用呈剂量依赖性。这些数据表明双蓣调脂汤可以减轻缺血性脑卒中后的脑损伤,可作为治疗缺血性脑卒中的候选药物。
方法:建立了大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型。本研究采用高、低剂量双蓣调脂汤或丁苯酞灌胃给药对大鼠MCAO模型进行干预。采用横木行走实验(BWT)评估各组大鼠神经功能恢复情况;采用HE染色法观察梗死区脑组织的病理变化;Nissl染色法观察梗死区神经元的变化;TUNEL法观察梗死区细胞凋亡情况;采用RT-PCR技术、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光检测神经突生长抑制因子A(Nogo-A)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)、Nogo受体(NgR)、蛋白激酶C(PKC)、RhoA的mRNA或蛋白的相对表达量;采用免疫酶联方法(ELISA)测定血清中TNF-α、IL-6的蛋白表达变化。
结果与结论:根据研究结果表明,双蓣调脂汤药物干预后MCAO模型大鼠神经功能缺损程度改善,外周炎性反应和凋亡细胞减少。进一步的研究表明,双蓣调脂汤能显著降低Nogo-A、MAG、OMgp和NgR的表达,下调PKC/RhoA信号通路的表达水平。且双蓣调脂汤减轻MCAO模型大鼠的脑损伤的作用呈剂量依赖性。这些数据表明双蓣调脂汤可以减轻缺血性脑卒中后的脑损伤,可作为治疗缺血性脑卒中的候选药物。