目的：为了获得高纯度有活性的SAHH,本实验在表达载体PQE30转化菌株E.coli BL21(DE3)成功构建的基础上,通过大量培养该菌来表达SAHH,利用层析方法来纯化SAHH,建立一套完整的纯化方案,并初步探讨其在生化试剂方面的应用。方法：1.在37℃以及摇床转速200rpm用1L LB肉汤培养基培养E.coli BL21(DE3),培养至对数期(OD600值约0.5),加入IPTG至浓度为0.5mmol/L诱导表达SAHH,诱导时间10h。2.采用匀浆法裂解细菌,通过硫酸铵分级沉淀得到蛋白酶SAHH的粗制品,再经Sepharose CL-6B Fast Flow、DEAE Sepharose Fast Flow以及Sephadex G-75层析柱进行细分离。3.采用SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹技术鉴定表达及纯化产物。4.根据循环酶法测定Hcy的原理,相同条件下用已知试剂和替代试剂分别检测相同血清中Hcy含量,并采用配对样本t检验比较差异有无统计学意义。结果：1.E.coli BL21(DE3)在37℃、摇床转速200rpm、IPTG浓度为0.5mmol/L以及诱导10h的条件下成功表达SAHH。2.利用层析技术纯化SAHH,获得SDS-PAGE电泳近乎单一蛋白,提纯的酶制剂进行电泳后实施PVDF转膜,转膜结构也是单一条带。3.通过比较已知试剂和替代试剂检测相同血清中的Hcy含量,结果发现p>0.05,差异无统计学意义。结论：1.用经典的大肠杆菌表达系统成功表达SAHH,表达稳定,操作简便,污染小。2.本研究成功地分离纯化SAHH,整个提纯过程中SAHH较稳定,无降解。3.本研究初步证实纯化的SAHH具有一定的活性,在生化试剂应用上有一定的价值。