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油茶(Camellia oleifera)是一种富含油脂,具有极高种植价值的一类茶科植物,其广泛分布在我国南方。茶油是油茶籽经压榨或浸出所得的油脂,其不饱和脂肪酸含量高,营养价值高,具有“东方橄榄油”之称。茶籽饼粕(Camellia meal)是油茶籽经提油后的副产物,茶籽饼粕中含有丰富的蛋白质、纤维素、糖类、矿物质及微量元素,因此在食品、化工及饲料工业中具有极高的利用价值。茶皂素(Tea saponion)是一种五环三萜类化合物,具有良好的乳化、发泡、杀虫抑菌及刺激某些植物生长的作用,广泛应用于工业、农业、水产养殖及医药等行业。同时,茶皂素具有溶血和鱼毒作用,大量的存在无益于动物的生长,阻碍了茶籽饼粕在饲料业的利用,造成了资源的浪费。微生物发酵法是在外加微生物作用下对茶籽饼粕进行发酵,使微生物大量繁殖,分解利用茶皂素。与传统的物理、化学脱毒方法比较,不需要添加任何试剂,发酵产物不需进行后续处理即可直接利用,不仅能降解茶皂素,还可以提高茶籽饼粕中蛋白质及维生素的含量,可作为优良的饲用蛋白源。因此,利用微生物发酵法对茶籽饼粕进行脱毒研究,可为茶籽饼粕在饲料业的应用提供有力的实验依据,并能够带来较大的经济效益和环境效益。本文以茶籽饼粕为研究对象,以茶皂素含量为指标,利用微生物发酵法对其进行脱毒处理,分别进行了茶皂素降解菌的筛选鉴定,降解能力验证,及固态发酵工艺条件的优化,得到如下结论:(1)自活性污泥、微生物菌剂Z-231、Z-831及实验室保存菌种中筛选出降解茶皂素的菌株12种,分别为:Al、 A4、 A6、 Bl、 Cl、 C2、枯草芽孢杆菌T1、地衣芽孢杆菌T2、酿酒酵母T3、放线菌T4、青霉T6和黑曲霉T5。利用PCR扩增一测序结果,结合菌落形态、显微镜观察确定筛选出的6种菌株中,A1为串珠状赤霉Gibberella moniliformis、 A4为人苍白杆菌Ochrobactrum anthropi, A6、 Bl均为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis、C1为黑曲霉Aspergillus niger、 C2为恶臭假单胞菌属Pseudomonas putida o(2)利用摇瓶液体发酵对12种供试菌株进行茶皂素降解能力验证,结果显示:B1及黑曲霉T5的降解能力最强,枯草芽孢杆菌T1、地衣芽孢杆菌T2及放线菌T4的降解效果最差;自活性污泥、微生物菌剂Z-231和Z-831筛选出的菌株整体降解能力强于于实验室保存的菌株;真菌的降解能力要强于细菌。(3)以茶籽饼粕为固态发酵培养基,利用黑曲霉T5与B1为微生物发酵菌种进行固态发酵,以茶皂素含量为指标,研究茶籽饼粕固态发酵的工艺条件,并进行响应面实验及重复验证得到发酵的最优工艺条件:初始含水率44%,发酵温度33.7℃,初始添加盐酸0.39μmol/g,发酵时间156.7h,此时茶籽饼粕中的茶皂素含量为5.004%,效果比较理想。