【摘 要】
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Tet-off／Tet-on四环素诱导表达系统是比较成熟的真核生物基因诱导表达系统之一，具有高效、无毒、严密开／关功能的特点，已被成功应用于细胞和转基因鼠中基因诱导表达的研究。SV40
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Tet-off／Tet-on四环素诱导表达系统是比较成熟的真核生物基因诱导表达系统之一，具有高效、无毒、严密开／关功能的特点，已被成功应用于细胞和转基因鼠中基因诱导表达的研究。SV40 T是一种病毒癌蛋白，其与肿瘤抑制蛋白p53和Rb结合，并使之失活，消除了它们抑制细胞生长的功能，增加了细胞进入Gl-S期的数量，使细胞分裂加速，形成肿瘤。 本研究引入Tet-on四环素基因诱导表达系统，稳定筛选获得了表达Tet-on系统调节元件rtTA的阳性细胞CHO-pTet-on，再通过稳定筛选又成功得到导入其反应元件的双阳性细胞CHO-pTet-on-pTRE2-SV40T-Hyg，经Dox诱导表达了目的基因SV40 T，建立了Tet-on基因诱导表达系统的细胞诱导表达研究平台。 利用经细胞诱导表达证实的重组质粒，采用显微注射的方法，成功获得了Tet-on双阳性转基因小鼠，并且三个模型中的pTet-on、pTRE2-SV40 T基因均可通过生殖器稳定遗传，从而建立了Tet-on基因诱导表达系统的转基因小鼠诱导表达的研究平台。 利用Founder 123#转基因小鼠成功建立了Tet-on系统诱导表达SV4O T转基因小鼠脑成神经管细胞瘤模型。从而我们可以定时、定量地控制致癌基因SV40 T的表达，为探讨SV40 T在脑成神经管细胞瘤形成中的作用创造了条件，为研究SV40 T与其它相关基因的相互作用提供了前提和基础。
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