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热激蛋白(heat shock proteins,HSPs)又称热休克蛋白,是生物体在受热或其他因素作用下产生的蛋白质分子,与生物的发育和抗逆密切相关。本研究克隆了菜蛾盘绒茧蜂Cotesia vestalis体内4个hsps基因,并研究了菜蛾盘绒茧蜂hsps与发育的关系以及高温胁迫下菜蛾盘绒茧蜂及其寄主小菜蛾Plutella xylostella的hsps表达模式。现将研究结果总结如下:1)菜蛾盘绒茧蜂hsps的克隆及其序列分析通过数据库检索、PCR、RT-PCR、RACE等技术和手段,共获得菜蛾盘绒茧蜂4个hsps的cDNA和基因组DNA序列,涉及3个热激蛋白家族。Cvhsp40的cDNA全长1473bp,其中包含长度为1068bp的ORF,可翻译成长度为355个氨基酸的蛋白质,其理论分子量为39.1kDa,基因组序列内不含内含子。Cvhsp70的cDNA全长2151bp,其中包含长度为1938bp的ORF,可翻译成长度为645个氨基酸的蛋白质,其理论分子量为70.1kDa,基因组序列内不含内含子。Cvhsc70的cDNA全长2327bp,其中包含长度为1956bp的ORF,可翻译成长度为651个氨基酸的蛋白质,其理论分子量为71.2kDa,基因组序列内含有两个内含子。Cvhsp90的cDNA全长2663bp,其中包含长度为2172bp的ORF,可翻译成长度为723个氨基酸的蛋白质,其理论分子量为83.3kDa,基因组序列内不含内含子。2)菜蛾盘绒茧蜂不同发育时期hsps的表达规律通过特异性引物和荧光定量PCR方法分别检测了菜蛾盘绒茧蜂4个hsps在不同发育时期(1龄末幼蜂、2龄初幼蜂、2龄末幼蜂、3龄幼蜂(结茧后1天)、蛹(结茧后4天)、初羽化雌蜂和初羽化雄蜂)的表达规律。结果表明Cyhsp40和Cvhsc70的表达规律是随着发育的进程先降低再升高,Cvhsp70的表达规律是随着发育的进程先升高再降低,Cvhsp90的表达规律是随着发育的进程先降低再升高再降低。同时,Cvhsp40和Cvhsc70在雌成虫中表达量最高,Cvhsp70在蛹中表达量最高,Cvhsp90在1龄幼虫和3龄幼虫中表达量最高。3)高温胁迫条件下菜蛾盘绒茧蜂及其寄主小菜蛾hsps的表达模式通过特异性引物和荧光定量PCR方法分别检测了菜蛾盘绒茧蜂1龄幼蜂、2龄初幼蜂、2龄末幼蜂、3龄幼蜂(结茧后1天)、蛹(结茧后4天)、初羽化雌蜂和初羽化雄蜂以及寄主小菜蛾的4个hsps在高温胁迫(27~42℃处理1h,24℃恢复1h)下表达规律,24℃放置2h作为对照。结果表明,热胁迫条件下不同发育时期的菜蛾盘绒茧蜂hsps表达模式不一样,总体趋势是随温度上升hsps表达量上升,但是在菜蛾盘绒茧蜂2龄初幼蜂中hsp40和hsp90的表达量在32℃处理显著下降;hsc70的表达量在27℃、32℃处理显著低于在24℃对照处理,这可能与寄生蜂和寄主间相互作用相关。在24℃条件下,菜蛾盘绒茧蜂的寄生可以诱导小菜蛾4龄初幼虫hsc70和4龄中小菜蛾幼虫hsp70、hsc70、hsp90的表达量的升高。而在高温和寄生的同时作用时,hsps的表达模式变化较大,被寄生小菜蛾4龄初幼虫hsp40、hsp70,以及4龄中幼虫hsp40的Tmax诱导hsps表达量达到最高值的温度)比在相对应的未寄生小菜蛾中高5℃;其他龄期未寄生与被寄生小菜蛾hsps的Tmax基本一致,说明了在寄生蜂发育的初期和中期,寄生能诱导寄主hsps表达并引起寄主抗热性增强,由此认为寄生蜂的寄生影响了寄主对环境的适应性。