Gelonin是来源于大戟科植物Gelonium.multiflorum种子中的一种细胞毒蛋白，由251个氨基酸残基组成，分子量约为28000。Gelonin属于单链核糖体失活蛋白，具有RNA特异性的N-糖苷酶活性，可专一性地水解真核细胞核糖体60S亚基28S rRNA第4324位腺嘌呤的N-C糖苷键，释放一个腺嘌呤(A)碱基使核糖体失活，从而抑制蛋白质的生物合成，导致细胞死亡。此外，Gelonin也具有类DNase活性和糖基化酶活性，可降细胞核DNA。由于Gelonin缺少双链核糖体失活蛋白的B链，因此，它对完整真核细胞的毒性比较低，常被作为免疫毒素的毒蛋白，用于研究或治疗自身免疫性疾病或恶性肿瘤。 根据已知Gelonin的氨基酸序列，逆向推算出整个基因的碱基序列，根据E.coli的密码子偏爱性和后续基因克隆的需要，通过沉默突变设计相应的酶切位点和碱基序列，将整个基因分为四段，每个片段约175～220bp，每一个片段中的互补链从5′末端化学法合成100～120碱基的单链，其中两个链的3′末端有20个碱基互补。利用T4DNA聚合酶酶促添补成双链DNA，用分子克隆技术，分别构建重组子，然后再构建成含整个gelonin基因的表达载体pE-gel。经诱导表达后，获得分子量约为28000的重组蛋白，并主要以可溶形式存在。 基于Gelonin的二级结构预测及三维空间构象的数据，将Gelonin N-端区的Gly、Leu、Asp和／或C-端区的Asp、Lys、Asp、Pro、Lys的编码碱基序列分别删除后，用PCR法获得截短型gelonin DNA片段，分别引入原核表达载体pET28a中，构建成相应的重组子，并在Ecoli BL21中进行表达，获得了相应的可溶性表达产物。G-N3，G-C5，G-N3C5经镍柱和Sephacryl S200凝胶柱二步纯化获得了电泳纯的目的蛋白，Western blot分析表明，利用基因工程技术获得的重组细胞毒素Gelonin具有与天然细胞毒素Gelonin相似的生物活性。