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目的：以胶乳增强免疫比浊法作为基本原理,研发出一种具有自我知识产权的α1-微球蛋白(α1-MG)检测试剂,为临床提供一种诊断性能好、具有价格优势的试剂,并评价其在糖尿病肾病早期肾脏损伤方面的应用价值。方法：1.利用胶乳增强免疫比浊法制备α1--MG免疫微球,研究并确定α1-MG检测试剂所用的EDAC用量、胶乳直径、α1-MG抗体用量、反应时间等最佳条件,建立自制试剂在日立7170分析系统下的最佳反应体系,对成品试剂的精密度、线性范围、稳定性、回收性能、抗干扰等进行评价,并对自研试剂与美康试剂进行相关性分析。2.收集健康对照组(n=150)晨尿标本以确定尿液α1-MG的正常参考值范围。另选择糖尿病患者(n=81)以尿mAlb为分组依据分为正常蛋白尿组、微量蛋白尿组和大量蛋白尿组,收集患者静脉血和24h尿液分别测定血清a1-MG、肌酐以及24h尿mAlb、尿液α1-MG、尿液β2-MG.尿NAG酶含量,采用自研试剂测定受试者尿液及血清α1-MG含量。比较各实验组血清α1-MG、血清肌酐、24h尿mAlb、尿液α1-MG、尿液p2-MG、尿NAG酶水平的差异并进行相关性分析,利用ROC曲线评价比较各指标诊断糖尿病肾病的效能,以探讨糖尿病患者尿液α1-MG和血清a1-MG检测对糖尿病肾病的预测和诊断价值。结果：1.胶乳直径为80nm, EDAC的最佳用量为8.0mg/L～9.0mg/L,抗体与包被缓冲液体积比为0.08：1(每毫升包被缓冲液中抗体加入量为80μ1),最佳反应时间为3h。低、中、高三个不同浓度的批内CV分别为5.09%、2.68%和2.86%,批问CV分别为7.66%、3.30%和3.17%；线性范围为0～92.0mg/L;3个月内试剂具有良好稳定性；回收率为96.28%～103.45%,平均回收率为98.92%；血清中血红蛋白≤10g/L、胆红素浓度≤310ummol/L和甘油三酯≤6.5mmol/L时,对α1-MG的测定没有显著性干扰,但当甘油三酯浓度达到14.75mmol/L时对低浓度的α1-MG测定干扰较大,因此严重脂血标本测得的α1-MG值较低时应考虑高甘油三酯的干扰。对自研试剂和美康试剂分别测得的血清α1-MG的结果进行直线回归分析,得回归方程为Y=0.9787X.0.314,r=0.991,可以认为两种试剂具有极佳的正相关(P<0.01)；其中b=0.9787接近1,r>0.95,自研试剂可替代商品试剂应用于临床。2.测定150例正常对照者尿液α1-MG,确定正常成年人α1-MG参考值范围是0～12.8mg/L。采用24h尿mAlb作为分组依据,按尿mAlb结果将81例糖尿病患者分为正常蛋白尿组(n=39,尿mAlb<30mg/24h)；微量蛋白尿组(n=20,尿mAlb:30mg/24h-300mg/24h)；大量蛋白尿组(n=22,尿mAlb>300mg/24h)。随着尿mAlb排泄率的增加,血清肌酐、血清α1-MG、尿液α1-MG、尿液β2-MG及尿液NAG酶浓度均逐渐增高,大量蛋白尿组>微量蛋白尿组>正常蛋白尿组。尿液α1-MG、血清α1-MG与mAlb.p2-MG均呈正相关,但血清α1-MG与NAG酶无相关性。尿液α1-MG与血清α1-MG呈正相关,r=0.479。进一步分组分析发现,正常蛋白尿组中尿液α1-MG与β2-MG呈正相关,但与mAlb无相关性,血清α1-MG与其他指标相关性不大；大量蛋白尿组中尿液α1-MG与mAlb、p2-MG呈正相关；血清α1-MG与尿液α1-MG、mAlb呈正相关。ROC曲线结果显示尿液α1-MG的AUC为0.894,尿mAlb、血清α1-MG、尿液β2-MG、尿NAG酶的AUC分别为0.816,0.806,0.770和0.680(P<0.05),表示在对糖尿病肾脏损害的诊断上尿液α1-MG和血清α1-MG均具有较高价值。结论：1.成功制备了以胶乳增强免疫比浊法为原理的α1-MG检测试剂,制备的成品试剂具有较高的临床应用价值,为临床实验室提供了新的选择。2.尿液α1-MG和血清α1-MC较血肌酐、尿mAlb等其他肾功能指标在反映糖尿病患者的早期肾损害及肾损害进程方面更为敏感特异,可辅助糖尿病肾病早期诊断和病情监测。