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【研究目的】探索Beclin-1、PDCD4、Twist1在胃癌(gastric cancer,GC)组织中的表达情况以及血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)在胃癌组织中的存在情况,并分析其与预后的关系,为胃癌的治疗寻找一个靶点;探索降表达Beclin-1基因对胃癌BGC7901细胞株增殖侵袭能力的影响。【研究方法】1.在蚌埠医学院第一附属医院病理科收集2013年1月至2013年12月期间113例胃癌根治术的胃癌组织标本和其相对应的癌旁组织,并且统计其临床信息。2.利用HE结合免疫组化染色观察113例胃癌标本以及癌旁正常组织中Beclin-1、PDCD4、Twist1表达情况,用CD34/PAS套染寻找113例胃癌标本中是否含有VM结构,并统计VM的数量,统计分析实验结果与临床病理参数之间的关系。3.对这113例胃癌患者进行随访,随访至死亡或最后随访日期为2019年3月1日,统计患者的生存情况,分析生存时间与实验结果及临床病理参数之间的关系。4.通过shRNA技术稳定转染构建低表达Beclin-1基因的BGC7901细胞株,将实验细胞分为转染组、空载体组和对照组。5.Western blot方法检测三组细胞Beclin-1蛋白的表达差异验证目的基因的转染效果。6.CCK8细胞增殖实验检测三组细胞的增殖能力,分析统计其差异。7.划痕实验观察并计算三组细胞迁移能力,分析统计其差异。8.Transwell迁移及Transwell侵袭实验检测三组细胞迁移和侵袭的能力,分析统计其差异。【研究结果】1.113例胃癌组织中Beclin-1、PDCD4、Twist1、VM的阳性率分别为49.56%(56/113)、30.97%(35/113)、56.64%(64/113)、32.74%(37/113),其中在随机10个高倍镜下一共发现893个VM结构,有34个VM结构中存在一些红细胞。2.113例胃癌组织中Beclin-1、PDCD4、Twist1、VM阳性情况与病理分级,肿瘤的直径,浸润程度,淋巴结转移,临床TNM分期有统计学意义(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤发生部位、肿瘤类型没有统计学意义(P>0.05)。3.Beclin-1阳性率与PDCD4呈正相关(r=0.638,P<0.001),与Twist1(r=-0.740,P<0.001)和VM(r=-0.578,P<0.001)阳性率呈负相关;PDCD4阳性率与Twist1(r=-0.766,P<0.001)和VM(r=0.467,P<0.001)呈负相关,Twist1阳性率与VM(r=0.611,P<0.001)呈正相关。4.患者的生存时间与Beclin-1、PDCD4、Twist1、VM的阳性率,肿瘤直径、分级、浸润程度、淋巴结转移、TNM分期存在差异,并具有统计学意义(P<0.05),而患者的生存时间与年龄、性别、肿瘤部位、类型差异不具有统计学意义(P>0.05)。5.Beclin1、PDCD4、Twist1、VM的阳性率以及肿瘤大小、浸润深度和临床TNM分期是胃癌患者生存的独立预后因素。6.Western blot结果显示Beclin-1蛋白在转染组的灰度值比值低于空载体组和对照组(P<0.05)。7.CCK8细胞增殖实验结果显示,转染组细胞的增殖能力高于空载体组和对照组(P<0.05)。8.划痕实验结果显示24小时以后,转染组细胞的迁移能力高于空载体组和对照组(P<0.05)。9.Transwell迁移及侵袭实验结果均显示24小时以后,转染组细胞穿膜个数高于空载体组和对照组(P<0.05)。【研究结论】1.Beclin-1和PDCD4对肿瘤的进展起到抑制作用,Twist1和VM促进肿瘤的进展,提示预后不良。2.降表达Beclin-1基因,在正常培养条件下一定程度上增强了胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力。