论文部分内容阅读
为探讨高钙致痛风的机理和为痛风的防制提供理论基础，本文对高钙日粮引起鸡痛风进行了体内和体外实验研究。本研究分为三部分： 试验一探讨了高钙导致鸡尿液及尿沉渣的变化情况。将100羽35日龄健康伊沙蛋雏鸡随机均分为对照组和高钙组。对照组饲喂全价雏蛋鸡料(含钙1.0％)，高钙组在此基础上添加石粉使饲料中实际含钙量达3.85％。两组鸡均进行结肠造口术，收集尿液，研究鸡尿液及尿沉渣的变化。结果表明，高钙日粮导致严重的肾脏病变，尿量增加，与对照组比较差异显著(p＜0.01)；尿液pH值升高，与对照组比较差异不显著；高钙组鸡尿液中钾、钙(p＜0.01)、钠、镁(P＜0.05)的相对含量均显著低于对照组；尿液尿酸低于对照组，但统计学差异不显著；无机磷的相对含量与对照组相近。高钙组鸡尿液中钙(p＜0.01)、尿酸、镁、及无机磷(p＜0.05)的总量显著高于对照组，钠(p＜0.01)和钾(p＜0.05)的总量低于对照组，统计学差异显著。扫描电镜下，高钙组尿沉渣晶体中针状较多。能谱分析表明，尿沉渣中钙、磷含量升高，而钾、钠下降。 试验二用高钙与高蛋白日粮对鸡痛风进行了人工发病实验研究。120只35日龄健康蛋仔鸡随机均分为3组，对照组饲喂基础日粮，高钙组(high calcium，HC)在饲喂基础日粮的同时添加石粉(含钙3.80％)，高钙高蛋白组(high calcium and high protein，HCHP)在饲喂基础日粮的同时添加石粉和豆粕(含钙3.55％，粗蛋白24.58％)，进行30天饲养试验。结果显示：HC组鸡出现肾脏损害，未见尿酸盐在内脏器官的沉积；与对照组相比，血清无机磷显著降低(p＜0.01)，血清尿酸、钠(P＜0.05)显著升高；尿液的检查显示尿液中尿酸、钙(p＜0.01)、无机磷、镁和钾离子(P＜0.05)总量显著升高，钠离子总量显著降低(P＜0.05)。HCHP组鸡发生典型内脏型痛风，尿酸盐在内脏器官表面沉积；血清尿酸(p＜0.01)、钙(P＜0.05)显著升高；尿液中尿酸、钙、镁(p＜0.01)、无机磷和钾(P＜0.05)总量与对照组相比显著升高，钠离子总量与对照组相比显著降低(p＜0.05)。尿沉渣扫描电镜观察，高钙和高蛋白日粮均可造成尿沉渣晶体形态结构的改变，其中HC组鸡尿沉渣中以针状晶体较多，球形晶体较少；HCHP组鸡尿沉渣中针状与球状晶体含量相当。能谱分析结果表明，HC、HCHP组鸡尿沉渣钾离子、钠离子均下降；无机磷均升高；HCHP组磷含量最高；HC组钙含量最高。 实验三，建立了鸡原代肾小管上皮细胞的培养方法，作为高钙对肾小管损害的体外研究模型。在此模型上应用不同浓度的钙进行处理，通过MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法观察钙对细胞活性和细胞膜的损伤情况。结果表明，分别用2.5mmol／L(试验组Ⅰ)，4.0mmol／L(试验组Ⅱ)，5.5mmol／L(试验组Ⅲ)，7.0mmol／L 高钙日粮引起鸡痛风的体内和体外研究（试验组 IV），8．5 auno ／L（试验组 V）和 10．0 uuno几（试验组 VI）Ca‘”处理细胞，各组的细胞活性与对照组相比均显著降低，细胞外钙浓度越高，细胞活性降低越明显。不同浓度的Ca‘“处理细胞，对培养液中LDH的活性影响不明显。