植物生长调节剂和抗氧化剂对微藻M.afer神经酸产量的影响

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神经酸(C24:1,Δ15)是动物神经细胞和神经组织的重要成分,是促进受损神经细胞和组织修复、再生的重要物质。近年来的神经酸生产已经从鲨鱼油提取逐步向水生藻类提取转变。提高生产效率是现阶段的主要研究方向,但通过外加试剂提高神经酸产量的研究较少。微藻Mychonastes afer是2011年筛选出的富含神经酸的产油藻株,神经酸含量能占到总油脂含量的5%以上,具有重要的经济价值。在微藻培养过程中,部分植物生长调节剂和抗氧化剂作为添加剂能够提高产物产量。其中植物生长调节剂也被称作植物激素,广泛应用于调控作物生长发育,部分植物生长调节剂可提高植物的蛋白质、糖、脂肪酸等含量。抗氧化剂在生物体内通过电子转移、络合金属离子、联合抗氧化作用和影响基因表达等机理起作用,在食品、医药、保健品和化妆品等方面有广泛应用,尤其在植物生物积累阶段,可有效地抑制油脂被氧化。本实验共使用了5种添加剂,包括4种植物生长调节剂:萘乙酸(NAA)、芸薹素内酯(BR)、苄氨基嘌呤(BAP),以及2种抗氧化剂:丁基羟基茴香醚(BHA)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。其中,NAA可以有效地提高神经酸产量,浓度为0.3mg/L的萘乙酸实验组在添加4d后,神经酸占总脂肪酸含量达到6.344%,较对照组及其它实验组提高了73%。另外,1μM/L的EGCG添加到培养基中2d后,总油重达到干重的61.1%,较对照组及其他实验组提高约10%。其它3种添加剂组的比重及神经酸产量,较对照组均未有提高。研究表明NAA及EGCG对提高M.afer的神经酸产量有明显效果。NAA的添加可以提高微藻的生物量和神经酸含量;EGCG能够提高脂肪酸在细胞中的积累量。实验根据阶段实验结果进行了联合使用实验,实验证明联合使用效果优于单一添加效果。联合使用组神经酸含量高出单一使用近30%,含油量提高约1.5倍。同时,本文通过对叶绿素荧光参数的监测,分析了两种添加剂的添加对微藻M.afer光合效率的影响。结果表明,NAA的添加对微藻M.afer的光系统Ⅱ(PSⅡ)基本无影响,对光系统I(PSI)具有激活作用,综合双光系统表明NAA可以促进微藻M.afer的光合作用;EGCG的添加对微藻M.afer光系统Ⅱ(PSⅡ)的活跃度起到了提高作用,对M.afer光系统I(PSI)产生了抑制,综合双光系统显示EGCG对微藻M.afer的光合作用总效率无影响。
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