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目的:本实验通过观察抵当汤对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及TXA2、6-Keto-PGF1a的影响,探讨其防治胰岛素抵抗的作用及其机制,为临床应用提供理论依据。抵当汤出自《伤寒论》,其方由大黄、桃仁、水蛭、虻虫4药组成。前两者是植物药,后两者是虫类药。本实验采用高脂饮食制备大鼠胰岛素抵抗模型,通过测定大鼠空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及血浆TXA2、6-Keto-PGF1a含量的变化,并以经典中药血脂康作为阳性对照药,探讨抵当汤对胰岛素抵抗的作用及机制,从而为临床防治胰岛素抵抗提供科学依据。
方法:选用体重为180g-200g之间,清洁级雄性Wistar大鼠,35只,随机分为5组,每组7只,分别为:空白对照组(C组)、模型组(M组)、抵当汤低剂量组(D组)、抵当汤高剂量组(G组)、血脂康组(X组)。空白对照组给予普通饲料喂养;模型组、抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组、血脂康组给予高脂饲料喂养。高脂饲料配方为:2%的胆固醇、0.2%的胆酸钠、0.2%的丙基硫氧嘧啶、10%的猪油和87.6%普通饲料。
分组给药:空白对照组:给予普通饲料喂养,同时每天灌胃蒸馏水10ml/Kg;模型组:给予高脂饲料喂养,每天灌胃蒸馏水10ml/Kg灌胃;抵当汤低剂量组:给予高脂饲料喂养,每天灌胃抵当汤1g生药/Kg;抵当汤高剂量组:给予高脂饲料喂养,每天灌胃抵当汤2g生药/Kg;血脂康组:给予高脂饲料喂养,每天灌胃血脂康0.2g/Kg。连续喂养给药8周。
标本收集与处理:第8周最后一次给药后,禁食12小时,称重,断头取血,分离血清标本检测血糖(GLU),采用全自动生化分析仪;胰岛素(INS),采用放射免疫分析法;血脂(TC、TG、LDL、HDL),采用全自动生化分析仪;分离血浆标本检测血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a),采用放射免疫法。
结果:
1、抵当汤对大鼠血清Glu、INS的影响
Glu:模型组较空白对照组明显升高;抵当汤低剂量组较模型组明显降低,抵当汤高剂量组较模型组降低,无显著性差异。抵当汤低、高剂量组较血脂康组降低,无显著性差异。INS:模型组较空白对照组明显升高,抵当汤低剂量组较模型组明显降低;抵当汤高剂量组较模型组明显降低;抵当汤低、高剂量组与血脂康组相比无显著性差异。
2、抵当汤对大鼠HOMA-IR、ISI的影响
HOMA-IR:模型组较空白对照组明显升高,表明成功复制高脂饮食IR大鼠模型;抵当汤低、高剂量组与模型组相比均明显降低,抵当汤低、高剂量组与血脂康组相比无显著性差异。
ISI:模型组较空白对照组明显降低,表明高脂饮食可导致胰岛素敏感性降低;抵当汤低、高剂量组与模型组相比均明显升高,抵当汤低、高剂量组与血脂康组相比无显著性差异。
3、抵当汤对血脂的影响
TG:模型组较空白对照组明显升高,抵当汤低、高剂量组较模型组明显降低;抵当汤低、高剂量组与血脂康组相比无显著性差异。
TC:模型组较空白对照组明显升高,抵当汤低、高剂量组较模型组明显降低;抵当汤低、高剂量组较血脂康组降低,但无统计学意义。
HDL-C:模型组较空白对照组明显降低,抵当汤低、高剂量组较模型组明显升高;抵当汤低、高剂量组与血脂康组相比无显著性差异。
LDL-C:模型组较空白对照组明显升高,抵当汤低剂量组较模型组明显降低,抵当汤高剂量组较模型组明显降低,且抵当汤高剂量组作用优于抵当汤高剂量组;抵当汤低、高剂量组较血脂康组降低,但无显著性差异。结果表明:抵当汤可降低IR大鼠LDL-C,抵当汤高剂量作用优于抵当汤低剂量,且抵当汤低、高剂量作用均有优于血脂康组的趋势,但无统计学意义。
4、抵当汤对大鼠血浆血栓素、6-酮-前列环素水平的影响
TXB2:模型组较空白对照组TXB2含量显著升高,抵当汤低、高剂量组与模型组比较,TXB2含量显著降低;抵当汤低、高剂量组之间比较无显著性差异。抵当汤低、高剂量组较血脂康组降低,但均无显著性差异。
6-Keto-PGF1a:模型组较空白对照组6-Keto-PGF1a含量显著降低,抵当汤低剂量组较模型组含量显著升高,抵当汤高剂量组较模型组含量升高,但无统计学意义;与血脂康组比较,抵当汤低剂量组有优于血脂康组的趋势,但均无统计学意义。结果表明:抵当汤可升高IR大鼠6-Keto-PGF1a水平,且抵当汤低剂量作用优于低当汤高剂量。
结论:
1、大鼠IR模型可通过喂饲高脂饲料成功建立,表明IR与血脂异常存在着密切的关系。
2、抵当汤能改善IR大鼠胰岛素敏感性,表明抵当汤可防治IR。
3、抵当汤可调节血脂,防治IR大鼠脂代谢紊乱。
4、抵当汤可维持IR大鼠血栓素(TXB2)和前列环素(6-Keto-PGF1a)平衡。