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背景:在我国发病率和死亡率最高的癌症为肺癌,其中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）占肺癌发病人数的80%。NSCLC患者由于得不到及时治疗导致预后较差,5年总生存率为2%-17%不等,早期NSCLC患者无明显症状,但确诊后经及时的手术治疗5年总生存率可提高至80%以上。由于我国缺乏有效的肺癌早期筛查指标,使得早期肺癌患者确诊率低,导致肺癌患者错失最佳治疗时期。近年来,随着微小RNA（microRNA,miRNA）的发现和深入研究,miRNA与肿瘤发生发展的关系,及其作为诊断治疗手段的可能性成为研究的重点方向。miRNA参与了生长、增殖、分化和凋亡等众多的生物学过程,与多种人类肿瘤密切相关,比如肺癌、肝癌、乳腺癌、胰腺癌等。因此深入研究miRNA在人体肿瘤中的表达及其功能,对探索癌症的发病机制具有重要意义,并将有利于对肿瘤的诊断、治疗与预后的判断。目的:应用实时荧光定量PCR（Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR）方法检测NSCLC患者血浆中miRNA-301a/b的表达水平,并讨论miRNA-301a/b对NSCLC的诊断意义。将miRNA mimics/inhibitor转染进人A549肺癌细胞,使细胞中mi RNA-301a/b的表达上调或下调,研究miRNA-301a/b对人A549肺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法:（1）将收集到的55例NSCLC患者和34例健康人外周血进行离心,分离得到血浆,提取血浆总mi RNA,逆转录合成cDNA,qRT-PCR反应测定miRNA-301a/b的Ct值,采用2-??Ct分析方法计算NSCLC患者血浆样本中miRNA-301a/b的相对表达量。（2）对A549肺癌细胞进行转染miRNA mimics/inhibitor,使细胞上调或下调mi RNA-301a/b的表达,然后进行相关功能学的检测。通过CCK-8,PI染色,AnnexinⅤ和PI双染法流式细胞仪检测等方法分析上调或下调miRNA-301a/b的表达后对肺癌细胞增殖能力、周期和凋亡的影响。结果:（1）与健康对照组相比,NSCLC患者血浆中miRNA-301a/b的相对表达水平显著升高（P<0.01）。血浆miRNA-301a/b相对表达水平与NSCLC患者的临床病理特征未发现存在相关性,而与临床分期明显相关（P=0.008和P=0.044）。血浆mi RNA-301a、miRNA-301b及联合诊断NSCLC的ROC曲线下面积（area under curve,AUC）分别为0.801、0.887和0.891。miRNA-301a、mi RNA-301b及联合诊断腺癌的AUC分别为0.795、0.876和0.880。mi RNA-301a、mi RNA-301b及联合诊断鳞癌的AUC分别为0.810、0.906和0.910（2）转染miRNA mimics/inhibitor实验组miRNA-301a/b的表达水平与转染NC组差异显著（P<0.05）。A549肺癌细胞转染miRNA mimics后,细胞增殖能力得到促进。转染miRNA inhibitor后,进行细胞周期和凋亡流式细胞仪检测,结果显示G0/G1期和S期细胞占比增加,G2/M期比例相对减少,肺癌细胞出现明显的凋亡现象。结论:血浆mi RNA-301a/b在NSCLC患者中的高表达,及其与NSCLC患者分期的显著相关性,表明miRNA-301a/b诊断NSCLC具有一定的准确性,且对鳞癌的诊断效率更好。使miRNA-301a/b在A549细胞中高表达,细胞的增殖能力得到显著促进。使mi RNA-301a/b在A549细胞中低表达,细胞周期被显著阻滞在G0/G1期和S期,同时使细胞发生显著的凋亡现象。表明miRNA-301a/b以癌基因的身份参与NSCLC的发生发展过程,对细胞增殖、周期和凋亡过程进行调控,具有成为NSCLC诊断标志物的潜力。