论文部分内容阅读
促性腺激素释放激素受体(gonadotropin-releasing hormone receptor ,GnRHR)是由垂体促性腺细胞合成的一种高亲和G蛋白偶联受体,促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone, GnRH)在垂体促性腺细胞表面与GnRHR结合后,促进促卵泡素(follicle-stimulating hormone, FSH)和促黄体素(luteinizing hormone,LH)的合成和分泌,促进性腺的生长、成熟和调控哺乳动物的生殖发育。雌激素受体(estrogen receptor ,ESR)是核受体超家族成员之一,雌激素通过与ESR结合来调节靶组织的功能,能影响雌激素基因在雌性动物组织的表达与调控,从而对繁殖周期中卵泡的生长发育发挥作用。本研究以高繁殖力的黄淮山羊品种和低繁殖力的波尔山羊品种为研究材料,研究GnRHR基因外显子1、外显子2,以及ESR基因外显子4的单链核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)及其与黄淮山羊繁殖力之间的关系,为山羊繁殖力的分子育种提供科学依据和支撑。试验根据GenBank中发表的绵羊GnRHR基因的序列(L42937、L43841)和人、鸡、大鼠ESR基因的序列(AF123496、L79911、S52128),设计了4对引物,对山羊GnRHR基因和ESR基因的部分序列进行了克隆测序;采用PCR-SSCP技术分别检测黄淮山羊和波尔山羊在GnRHR基因外显子1、外显子2和ESR基因外显子4的突变位点,并分析基因多态性及其与黄淮山羊产羔性状间的相关性。结果表明:1.在4对引物中,有1对引物扩增片段存在多态性,P2引物扩增序列的突变位点位于GnRHR基因外显子1上。2.黄淮山羊、波尔山羊与绵羊GnRHR基因exon 1的序列的中只有3个碱基发生突变,其同源性为98%。3.在黄淮山羊和波尔山羊中均检测到AA、AB和BB三种基因型。测序分析发现AA基因型与BB基因型相比在58 bp处发生A→C碱基突变,氨基酸由赖氨酸改变为谷氨酰胺。4.群体遗传学分析表明,黄淮山羊P2引物检测到两个等位基因,频率分别为0.825和0.175,三种基因型(AA、AB和BB)频率分别为0.725、0.200和0.075。χ2适合度检验表明,引物P2在黄淮山羊群体中检测到的基因型分布不保持Hardy-Weinberg平衡。波尔山羊P2引物检测到等位基因频率分别为0.868和0.132;其对应的基因型(AA、AB和BB)频率分别为0.765、0.206和0.029。χ2检验表明,引物P2在波尔山羊群体中检测到的基因型分布保持Hardy-Weinberg平衡。5.相关分析表明,在黄淮山羊群体中, BB基因型黄淮山羊平均产羔数比AA基因型的多0.66只(P<0.05)差异显著,比AB基因型的多0.39只(P>0.05)差异不显著, AA与AB基因型的产羔数差异不显著。