苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt）是目前研究最深入的杀虫微生物，其杀虫蛋白基因也是应用最广泛和最有发展潜力的抗虫基因，因此，深入发掘Bt新菌株、分离克隆新型的杀虫基因对害虫的防治具有重要意义。近年来，鞘翅目害虫尤其是金龟甲科害虫的危害日趋严重，由于其幼虫（俗称蛴螬）生活在土壤中，给防治带来很大的困难，本研究从本实验室保存的菌株中筛选高毒力野生菌株，并从中分离克隆对金龟甲科害虫有效的新型杀虫蛋白基因，研究该基因的表达和杀虫活性，为构建高效广谱的Bt工程菌和培育转基因抗虫植物提供新型基因资源。本研究的主要内容和结果如下:　　 以本实验室分离的Bt菌株B-DLL质粒DNA为模板，利用特异性引物JJX5和JJX3扩增出3.5kb大小的片段，将该片段插入克隆载体pMD18-T中，筛选获得一个含新基因的克隆pMD18-cry8new。序列测定表明，该基因编码区为3525bps，编码的蛋白质由1174个氨基酸残基组成，理论分子量为133.05kD，等电点为pH4.69，为弱酸性蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank登录(Accessionnumber:HQ174208)，编码的氨基酸序列与Cry8Fa1的同源性最高达99.8％,被国际Btδ-内毒素命名委员会正式命名为Cry8Fa2。将cry8Fa2基因插入Bt表达载体pSXY422b中，电击导入Bt无晶体突变株HD-73-中，获得重组Bt工程菌HD73-Cry8Fa2，该工程菌能形成方形的伴孢晶体，并表达130kD的蛋白。生物测定结果表明，该基因表达产物对暗黑鳃金龟和华北大黑鳃金龟均不具有杀虫活性。