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研究目的：通过心室肌细胞离子通道膜片钳全细胞模式的建立，熟练掌握膜片钳整个试验过程，包括心室肌细胞的急性分离，电极拉制，细胞高阻抗封接，各种电流的记录及其分析。 研究方法：使用Langendorff灌流装置，依次采用无钙台氏液及含蛋白酶E的低钙台氏液经主动脉逆行灌注心脏（豚鼠），酶解过滤后获得单个心室肌细胞，在保存液中稀释并复钙至少1小时以上，选取杆状，边界整齐，横纹清晰的细胞用于实验。细胞悬液滴加于倒置显微镜（TE300，尼康，日本）工作台上的灌流槽中，细胞沉淀贴壁后，以2ml／min的速度在23～25℃灌流不同的测试液。微电极经拉制仪（P～97，Sutter，美国）二部拉制而成，充灌电极内液后阻抗2～5MΩ。电极与细胞亿欧姆封接并形成全细胞记录模式，电流的刺激程序和数据采集由计算机软件Pclamp8.2（Clampex8.2与Clampfit8.2，Axon Instrument公司，美国）控制。记录ICa，L的钳制电压-40mV，以10mV的阶跃使心室肌细胞由-40mV逐步去极化至+60 mV，刺激电压持续250ms。记录INa的钳制电压—90mV，以10mV的阶跃使心室肌细胞由-80mV逐步去极化至+60 mV，刺激电压持续60ms。记录IK的钳制电压-90mV，以10mV的阶跃使心室肌细胞由-90mV逐步去极化至+60 mV，刺激电压持续200ms。 结果：70％急性分离的心室肌细胞呈杆状，表面光滑，纹理清晰，耐钙，可用于试验，ICa，L电流在-25～-30mV被激活，峰电流激活电压-10～+10mV，激活与失活过程缓慢。INa电流在-60～-50mV被激活，峰电流激活电压-30～-40mV，激活与失活过程迅速。IK电流在-60～-50mV被激活，电流随去极化电压的升高而增加，IK电流包括多种钾电流成分，这些电流的电生理特性各不相同。 结论：通过急性分离获得良好的单个心室肌细胞以及膜片钳全细胞模式的建立解放军总医院军医进修学院第一部分博士学位论文对于各种电流的记录至关重要，IC吐，IN。与IK均为电压依赖性通道，上述电流的准确记录对于实验的进一步展开甚为关键。