前言：　　宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌、结直肠癌，且近年来发病率有逐年升高和年轻化的趋势。在中国青年女性（≤30岁）中宫颈癌的发病率每年增长2％～3％。流行病学和分子生物学研究证实高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是宫颈癌及癌前病变发生的必要但非充分原因。至少90％的宫颈癌患者中可发现HPV DNA，且持续感染时间越长，HPV的作用越强，其所导致的宫颈病变的恶性程度越高。在女性生殖道中约发现超过40种人乳头瘤病毒，其中15种是与宫颈癌发生相关的高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73和82)。在中国及其他亚洲国家的妇女中，HPV58的感染例数占所有HPV感染总数的11.5-28％，而在全世界范围仅为0-3％。　　在世界范围内，约有10.4％的女性感染HPV，但仅有不到1％发展为恶性病变。由此可见，高危型HPV的持续感染是宫颈上皮病变恶性转化的重要因素。高危型HPV的致癌性主要与E6、E7原癌蛋白的转化功能有关。HPV58E6和E7原癌蛋白使p53与成视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein，pRB)失活，从而打乱细胞周期，使感染细胞永生化。　　HPV的DNA在宿主细胞中以三种状态存在:即环状的游离基因，或整合入宿主细胞的DNA中，或二者共存的混合型。之前有研究表明，在宫颈良性病变和宫颈上皮内瘤变（CIN）中，HPV DNA多为游离状态;而在绝大多数的宫颈癌中HPV DNA整合到了宿主的基因组中。　　HPV基因整合保证了病毒原癌基因E6和E7持续表达。病毒基因的整合可以导致E2基因的断裂，从而废除E2基因对于病毒原癌基因E6和E7的转录抑制作用。因此，HPV基因整合保证了病毒原癌基因E6和E7持续表达从而引发恶变。由此，通过E2/E6的比值来了解HPV在宿主细胞中的整合状态，评价宫颈病变的恶性程度。CD4+、CD25+调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的T细胞亚群，可抑制自身免疫反应和机体对外来抗原或病原体的过度免疫反应，从而阻止自身免疫性疾病的发生。它与形成机体肿瘤免疫耐受相关，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。Foxp3又称叉状头/翅膀状螺旋转录因子，是Treg细胞的特异性的分子标识，具有决定Treg细胞发育和功能的作用。因此可以通过Foxp3的表达检测Treg细胞的数量。　　我们的前期研究显示:Foxp3的阳性表达率从慢性宫颈炎到宫颈上皮内瘤变(CIN)再到宫颈癌呈逐级增加趋势;Foxp3在宫颈癌组织中表达呈强阳性。但是Foxp3与高危型HPV的整合状态的关系还有待进一步研究。　　由于HPV58在中国乃至亚洲妇女中的高流行率及致癌性，本研究选取单一HPV58阳性的不同宫颈病变脱落细胞标本作为研究对象。通过检测HPV基因组与宿主细胞整合状态及相应的宫颈组织中Foxp3的表达情况，探讨Foxp3的表达与高危型HPV的整合状态在宫颈病变发生中的致病机制。　　实验方法：　　1、采用多重PCR技术检测119例单一HPV58阳性宫颈脱落细胞标本中HPV的E2及E6基因，包括经组织病理学确诊的CC18例，CINⅠ21例，CINⅡ33例，CINⅢ25例，正常对照组22例。通过E2/E6比值法评估HPV58在细胞内整合状态。分析HPV58整合状态与宫颈病变程度的相关性。　　2、采用免疫组化(SP)技术检测上述单一HPV58阳性的宫颈组织中Foxp3的表达情况。包括经组织病理学确诊的CC18例，CINⅠ21例，CINⅡ33例，CINⅢ25例，正常对照组22例。分析Foxp3在宫颈癌发生发展中的作用。　　结果：　　1、HPV58型在正常对照组中的整合率分别为72.73％、CINⅠ组的整合率为76.19％、CINⅡ组的整合率为81.82％、CINⅢ组的整合率为88.00％、在宫颈癌组的整合率为88.89％。HPV58的整合率随着宫颈病变严重程度的增加呈逐渐递增趋势，有统计学意义(x2=8.399，P=0.004，线性趋势x2检验）。　　2、Foxp3的阳性产物为棕黄色颗粒，Foxp3阳性表达于T淋巴细胞，定位于细胞核。Foxp3在正常对照组无阳性表达，CINⅠ组的阳性率为47.62％、CINⅡ组的阳性率为69.70％、CINⅢ组的阳性率为68.00％、在宫颈癌组的阳性率为83.33％。实验结果显示Foxp3表达强度与宫颈病变严重程度呈正相关，具有统计学意义(rs=0.538，P=0.000，Spearman等级相关分析)。　　3、Foxp3表达强度在HPV不同整合状态下是不同的，具有统计学意义(x2=12.058，P=0.002，KruskalWallis检验)。Foxp3的表达强度在混合组与纯粹游离组间无显著差异。Foxp3在纯粹整合组的表达强度明显高于混合组(U=99.00，P=0.006，Mann Whitney检验)。　　结论：　　1、HPV58基因整合与宫颈病变严重程度密切相关。　　2、Foxp3表达强度与宫颈病变严重程度密切相关。　　3、Foxp3表达强度与HPV整合状态密切相关。