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目的:肺结核(Pulmonary tuberculosis,PTB)患者外周血中免疫抑制性细胞亚群的上升及其它免疫细胞亚群比例的变化,可能与肺结核的进展密切相关。本研究旨在通过检测肺结核患者外周血中免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high、CD8+CD28-的分布特性及其与结核病临床指标、淋巴细胞亚群和单核细胞分布的相关性,来探讨其在影响免疫应答、导致结核进展中的作用与意义,并为肺结核的临床诊断提供有参考价值的免疫学指标。 方法:采用多色荧光标记和流式细胞术检测健康对照组(Healthy control,HC)、肺炎(Pneumonia)患者和PTB患者外周血中免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high、CD8+CD28-及CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD16+CD56+NK、CD19+B淋巴细胞亚群和CD14+单核细胞的分布;利用痰涂片抗酸染色镜检检查PTB患者分枝杆菌的排菌量;通过CT影像检测PTB患者肺部病灶进展情况;采用GraphPadPrism6.0软件对数据进行分析。 结果:将PTB患者外周血中各免疫细胞亚群的检测结果与HC、肺炎患者进行比较,并与PTB患者肺部影像、分枝杆菌的排菌量的关联性进行分析,以及将CD4+CD25high、CD8+CD28-比例与CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD16+CD56+NK、CD19+B淋巴细胞亚群和CD14+单核细胞的分布进行相关性分析,得出如下结果: (1)相对于HC组,PTB患者外周血中免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high、CD8+CD28-及CD8+T和CD14+单核细胞百分比均显著上升,而CD4+T、CD16+CD56+NK淋巴细胞亚群百分比则显著下降;相对于肺炎组,PTB患者外周血中免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high和CD14+单核细胞百分比均显著上升,而CD8+T淋巴细胞亚群百分比则显著下降;此外,各组间其它指标无明显变化。 (2)将PTB患者根据肺部CT影像及临床症状分为StageⅠ和StageⅡ组(参见研究方法)所述。将StageⅠ、StageⅡ、HC和肺炎组之间进行比较分析。结果表明:相对于HC组:StageⅠ组的CD4+CD25high和CD14+单核细胞百分比均显著上升,而CD3+T、CD16+CD56+NK淋巴细胞亚群百分比则显著下降;StageⅡ组的CD4+CD25high、CD8+CD28-及CD8+T和CD14+单核细胞百分比均显著上升,而CD4/CD8比值、CD16+CD56+NK淋巴细胞亚群百分比则显著下降。相对于肺炎组,StageⅠ组的CD4+CD25high和CD4+T百分比、CD4/CD8比值、CD14+单核细胞百分比均显著上升,而CD8+T下降;StageⅡ组仅CD14+单核细胞百分比均显著上升。相对于StageⅠ,StageⅡ组的CD8+CD28-及CD8+T百分比增高,而CD4+T细胞百分比、CD4/CD8比值下降。此外,各组间其它指标无明显变化。 (3)根据痰涂片抗酸染色检查结果,PTB患者分枝杆菌的排菌量分为4个等级组:+,++,+++和++++,将检测的免疫细胞亚群在此4组间进行比较。结果表明:++相对于+组之间CD8+CD28-及CD8+T百分比增高,而CD4+T细胞百分比、CD4/CD8比值下降;+++相对于+组之间CD8+CD28-及CD8+T百分比增高,而CD4+T、CD19+B细胞百分比、CD4/CD8比值下降;++++相对于+组之间CD8+CD28-及CD8+T百分比增高,而CD4+T细胞百分比、CD4/CD8比值下降;+++相对于++组之间CD19+B细胞百分比下降;++++相对于++组之间CD8+CD28-百分比上升,而CD4/CD8比值下降,CD19+B细胞百分比下降;此外,各组间其它指标无明显变化。 (4)将免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high、CD8+CD28-百分比分别与淋巴细胞亚群、单核细胞百分比间进行相关性分析。结果表明;CD4+CD25high抑制性细胞群体与在HC组中与淋巴细胞亚群、单核细胞百分比间均无明显相关性,而在PTB组和肺炎组中均与CD4+T百分比、CD4/CD8比值均呈显著正相关性,以及与CD8+T呈一定的负相关性。CD8+CD28-抑制性细胞群体在HC、肺炎组和PTB组中均与CD4+T、 CD19+B百分比、CD4/CD8比值呈负相关,与CD8+T百分比呈正相关;其在PTB和肺炎组与CD16+CD56+NK细胞百分比呈一定程度正相关;此外,这2种抑制性细胞亚群在各组中与其它细胞亚群间无明显相关性。 结论:PTB患者外周血中免疫抑制性细胞亚群CD4+CD25high、CD8+CD28-亚群比例显著增高并且CD8+CD28-抑制性细胞亚群数量增高与PTB进展相关,其可能通过抑制免疫应答、在一定程度上影响免疫细胞亚群间的比例,导致PTB的进展。