水稻OsWRKY14基因的分离与功能初步分析

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WRKY蛋白参与植物对生物或非生物胁迫反应,对植物生长发育、代谢途径具有重要的调控作用。从水稻基因组中分离OsWRKY14基因,并对该基因的功能进行了初步分析。 OsWRKY14编码320个氨基酸的蛋白,含1个WRKY保守域,锌指纹样式为C<,2>H<,2>,属WRKYIId亚组。一级结构分析表明,它与水稻和其它物种的WRKY蛋白的同源性不高,为一新的WRKY成员。 运用粒子轰击洋葱表皮细胞法证明OsWRKY14蛋白定位于细胞核。酵母单杂交实验表明OsWRKY14具有转录激活活性,并且C端14个氨基酸(207-220 aa)对其转录激活活性是必需的。 OsWRKY14受多种激素处理和环境胁迫的诱导。MeJA、ABA、GA3、ET能快速地诱导其表达:高盐、UV-B也诱导其表达。在受稻瘟菌侵染的hrmA转基因水稻中,OsWRKY14的表达水平上升,推测这个MRKY基因可能参与了hrmA基因诱导水稻抗性的反应。 构建了Ubi::OsWRKY14超表达载体和35S::dsOsWRKY14 RNAi载体,用农杆菌介导法转化水稻愈伤,共获得12个超表达株系,8个干涉株系。Northern Blot分析表明OsWRKY14基因在超表达水稻植株中是组成性表达的。超表达株系的T1代植株具有矮化、抽穗提前的表型,提示OsWRKY14可能参与调控植物生长发育途径。
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