【摘 要】
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目的:观察慢病毒介导的干细胞白血病基因对糖尿病豚鼠膀胱病变c-kit m RNA和蛋白的影响,为临床治疗DCP奠定理论基础。方法:通过链脲佐菌素制备豚鼠糖尿病豚鼠膀胱病变模型,将
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目的:观察慢病毒介导的干细胞白血病基因对糖尿病豚鼠膀胱病变c-kit m RNA和蛋白的影响,为临床治疗DCP奠定理论基础。方法:通过链脲佐菌素制备豚鼠糖尿病豚鼠膀胱病变模型,将36只糖尿病膀胱病变豚鼠随机分为3组,空白对照组(n=12)、阴性对照组(n=12)、实验组(n=12)。空白组对照组给予PBS液0.2ml;阴性对照组灌注未携带SCL基因的慢病毒+PBS液0.2ml;实验组灌注滴度为2×107IU慢病毒0.2ml。分别在转染后2d、7d、14d、28d每次每组处死3只豚鼠,留取膀胱组织采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot方法检测慢病毒转染后DCP膀胱中C-kit m RNA和蛋白相对表达水平,并比较其差异。结果:90只豚鼠注射STZ后,发生死亡4只,共筛选出DCP模型38只,模型成功率为44.2%。慢病毒转染后2d,实验组C-kit m RNA表达水平升高,7d时显著升高,并到达峰值,随后在14d和28d时降低,但均高于空白对照组和阴性对照组(p<0.05)。空白对照组和阴性对照组C-kit m RNA表达比较差异无统计学意义(p>0.05)。慢病毒转染后2d,实验组C-kit蛋白表达水平升高,7d时显著升高,并到达峰值,14d时降低,但均高于空白对照组和阴性对照组(p<0.05),28d时三组C-kit蛋白表达水平比较差异无统计学意义(p>0.05),空白对照组和阴性对照组C-kit蛋白表达比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:SCL慢病毒成功转染豚鼠DCP膀胱后,能够持续、稳定、长效的表达,并能够显著上调c-kit m RNA和蛋白的表达,这也为治疗DCP提供了新的途径。
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