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【目的】
本实验采用姜黄素药液作用于人肝癌HepG2细胞，探讨姜黄素抑制人肝癌HepG2细胞增殖的作用机制，从而为姜黄素在临床治疗肝癌方面提供理论依据。
【方法】
采用不同浓度的姜黄素药液作用于人肝癌HepG2细胞，并设纯DMEM培养HepG2细胞作为空白对照组。
（1）应用MTT法检测细胞抑制率，并且绘制曲线图，筛选姜黄素最佳的作用浓度及时间；
（2）用流式细胞仪检测姜黄素各浓度组对HepG2细胞凋亡的影响；
（3）采用流式细胞仪检测姜黄素各浓度组对HepG2细胞周期的影响；
（4）通过细胞划痕实验检测姜黄素对HepG2细胞迁移能力的影响；
（5）采用免疫细胞化学SABC法检测相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达，相关周期蛋白Cyclin-A1、Cyclin-B1的表达，以及VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白表达。
【结果】
（1）MTT结果表明，姜黄素可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞增殖，并呈药物浓度依赖性，空白对照组，20，40，60μmol/L的姜黄素药液组48h的抑制率分别是：0、42.90%、55.68%、66.76%，姜黄素药液组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。
（2）细胞凋亡结果表明：姜黄素对人肝癌HepG2细胞具有明显的诱导凋亡作用，空白对照组，20，40，60μmol/L的姜黄素药液组48h的凋亡率分别是：0.3%、18.0%、24.7%、86.9%，姜黄素药液组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。免疫细胞化学结果显示：空白对照组Bcl-2呈强阳性表达，而Bax、Caspase-3低表达，随着姜黄素药液浓度的增加，HepG2细胞内Bcl-2蛋白表达减少，Bax、Caspase-3蛋白的表达增多，提示姜黄素可能通过下调Bcl-2，上调Bax、Caspase-3的表达进而诱导HepG2细胞凋亡；
（3）细胞周期结果表明：姜黄素药液处理的HepG2细胞在S期阻滞，空白对照组，20μmol/L的姜黄素药液组，其S期的百分比分别为24.11%、32.68%，姜黄素组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。免疫细胞化学结果显示：20μmol/L的姜黄素组HepG2细胞内Cyclin-A1蛋白的表达与空白对照组相比明显减少，而Cyclin-B1的表达在姜黄素药液作用前后无明显变化，提示姜黄素可能通过下调Cyclin-A1的表达阻滞HepG2细胞在S期，进而抑制HepG2细胞增殖；
（4）细胞划痕实验结果表明：姜黄素药液可以有效的抑制人肝癌HepG2细胞迁移，随着药液浓度的增高，划痕愈合率逐渐降低，而空白对照组愈合的最为明显，姜黄素组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05），说明姜黄素药液可以抑制HepG2细胞的迁移；
（5）免疫细胞化学SABC法检测蛋白VEGF、HIF-1α及STAT3的表达表明：随着姜黄素药液浓度的增加，HepG2细胞内VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达与空白对照组相比均显著减少，说明姜黄素可能通过下调VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达抑制HepG2细胞的增殖。
【结论】
（1）姜黄素对人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制增殖作用；
（2）姜黄素通过下调Bcl-2，上调Bax、Caspase-3蛋白的表达诱导HepG2细胞凋亡；
（3）姜黄素通过下调CyclinA1蛋白的表达使HepG2细胞周期阻滞于S期；
（4）姜黄素可以抑制HepG2细胞的迁移；
（5）姜黄素通过下调VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达，发挥抑制HepG2细胞增殖作用。
本实验采用姜黄素药液作用于人肝癌HepG2细胞，探讨姜黄素抑制人肝癌HepG2细胞增殖的作用机制，从而为姜黄素在临床治疗肝癌方面提供理论依据。
【方法】
采用不同浓度的姜黄素药液作用于人肝癌HepG2细胞，并设纯DMEM培养HepG2细胞作为空白对照组。
（1）应用MTT法检测细胞抑制率，并且绘制曲线图，筛选姜黄素最佳的作用浓度及时间；
（2）用流式细胞仪检测姜黄素各浓度组对HepG2细胞凋亡的影响；
（3）采用流式细胞仪检测姜黄素各浓度组对HepG2细胞周期的影响；
（4）通过细胞划痕实验检测姜黄素对HepG2细胞迁移能力的影响；
（5）采用免疫细胞化学SABC法检测相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达，相关周期蛋白Cyclin-A1、Cyclin-B1的表达，以及VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白表达。
【结果】
（1）MTT结果表明，姜黄素可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞增殖，并呈药物浓度依赖性，空白对照组，20，40，60μmol/L的姜黄素药液组48h的抑制率分别是：0、42.90%、55.68%、66.76%，姜黄素药液组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。
（2）细胞凋亡结果表明：姜黄素对人肝癌HepG2细胞具有明显的诱导凋亡作用，空白对照组，20，40，60μmol/L的姜黄素药液组48h的凋亡率分别是：0.3%、18.0%、24.7%、86.9%，姜黄素药液组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。免疫细胞化学结果显示：空白对照组Bcl-2呈强阳性表达，而Bax、Caspase-3低表达，随着姜黄素药液浓度的增加，HepG2细胞内Bcl-2蛋白表达减少，Bax、Caspase-3蛋白的表达增多，提示姜黄素可能通过下调Bcl-2，上调Bax、Caspase-3的表达进而诱导HepG2细胞凋亡；
（3）细胞周期结果表明：姜黄素药液处理的HepG2细胞在S期阻滞，空白对照组，20μmol/L的姜黄素药液组，其S期的百分比分别为24.11%、32.68%，姜黄素组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05）。免疫细胞化学结果显示：20μmol/L的姜黄素组HepG2细胞内Cyclin-A1蛋白的表达与空白对照组相比明显减少，而Cyclin-B1的表达在姜黄素药液作用前后无明显变化，提示姜黄素可能通过下调Cyclin-A1的表达阻滞HepG2细胞在S期，进而抑制HepG2细胞增殖；
（4）细胞划痕实验结果表明：姜黄素药液可以有效的抑制人肝癌HepG2细胞迁移，随着药液浓度的增高，划痕愈合率逐渐降低，而空白对照组愈合的最为明显，姜黄素组与空白对照组比较有明显差异（p＜0.05），说明姜黄素药液可以抑制HepG2细胞的迁移；
（5）免疫细胞化学SABC法检测蛋白VEGF、HIF-1α及STAT3的表达表明：随着姜黄素药液浓度的增加，HepG2细胞内VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达与空白对照组相比均显著减少，说明姜黄素可能通过下调VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达抑制HepG2细胞的增殖。
【结论】
（1）姜黄素对人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制增殖作用；
（2）姜黄素通过下调Bcl-2，上调Bax、Caspase-3蛋白的表达诱导HepG2细胞凋亡；
（3）姜黄素通过下调CyclinA1蛋白的表达使HepG2细胞周期阻滞于S期；
（4）姜黄素可以抑制HepG2细胞的迁移；
（5）姜黄素通过下调VEGF、HIF-1α及STAT3蛋白的表达，发挥抑制HepG2细胞增殖作用。