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本论文主要探讨三氧化二砷(As203)通过上调miR-98表达缓解博莱霉素(BLM)诱导大鼠肺纤维化损伤的机制,整体分两部分：(一)个体水平研究As2O3、miR-98在BLM诱导大鼠肺纤维化损伤中的作用；(二)细胞水平探讨As2O3、miR-98抗纤维化的分子机制。1.个体水平研究As2O3、miR-98在BLM诱导的大鼠肺纤维化发病中的作用；(1)成功建立BLM诱导大鼠肺纤维化模型。40只大鼠随机分为BLM造模组(0d、14d、28d)、As2O3干预组及生理盐水(NS)造模对照组。BLM造模采用博来霉素5mg/kg气管内注射,NS造模采用生理盐水1ml/kg气管内注射,As203干预组自BLM造模14天开始给予As2O3(0.4mg/kg/d)尾静脉注射治疗14天。BLM模型组分别在造模同时、造模后14、28天处死,NS造模对照组28天处死。As203干预组在造模后28天即治疗14天后处死。然后通过HE染色观察大鼠肺组织形态变化、Masson染色观察肺组织内胶原的表达、羟脯氨酸(HYP)检测肺组织内胶原含量,Western blotting检测肺组织内a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)及E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,综合分析As203对肺纤维化发展的干预作用。结果显示,随着BLM造模时间的延长,气管内注射BLM大鼠肺间质逐渐增宽,肺泡结构紊乱,间质胶原沉积逐渐增多,胶原含量明显增加,而NS造模组肺组织结构变化不著,As2O,治疗组肺间质增宽较28d BLM造模组减轻,证明大鼠肺纤维化模型成功构建,As203治疗可以减轻博来霉素所致的大鼠肺纤维化损伤。(2)检测miR-98在肺纤维化模型中的表达变化。RT-qPCR检测各组肺组织中miR-98的表达,提示随着BLM诱导肺纤维化的发生,miR-98的表达逐渐减低,As203治疗组miR-98的表达较28d BLM造模组显著增加,提示As203可能通过miR-98发挥治疗作用。(3)检测miR-98下游Jak-Stat3信号因子及Bax/Bcl-2的表达。随着BLM造模时间的延长,肺组织内Stat3及p-Stat3表达均明显增加,伴有肺组织内Bax/Bcl-2表达比率的升高。与此相反,As203治疗抑制了Jak-Stat3信号通路及Bax/Bcl-2的表达,提示As203可能通过上调miR-98抑制Jak-Stat3信号通路发挥其抗纤维化效应。2.细胞水平探讨As203及miR-98抗纤维化的分子机制。(1)TGF-β1诱导A549细胞发生上皮间质转分化(EMT)构建纤维化发生的细胞模型。在细胞培养液中加入TGF-β1, A549细胞逐渐发生形态变化,由立方形或三角形逐渐变为长梭形；免疫荧光检测显示细胞表面上皮标志性蛋白E-Cadherin表达减少,相反,间质标志性蛋白α-SMA表达增加,即TGF-β1可诱导A549细胞发生EMT。(2)As203干预及miR-98转染A549细胞对TGF-β1诱导A549细胞EMT的影响。细胞形态学观察,提示As203干预及miR-98转染A549细胞可以减轻TGF-β1诱导A549细胞发生EMT的形态变化。免疫荧光检测提示,As203干预及miR-98转染A549细胞可以促进细胞表达上皮标志性蛋白E-Cadherin,同时降低间质标志性蛋白α-SMA的表达。(3)As203干预及miR-98转染A549细胞可以抑制Jak-Stat3信号通路活化及Bax/Bcl-2的表达。Western Blotting结果提示As203干预及miR-98转染可以通过降低细胞内Stat3及p-Stat3的表达,同时降低Bax/Bcl-2比值,有效抑制EMT的发生。