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目的:建立中国人膀胱癌BIU-87细胞系的裸鼠移植瘤模型,并对膀胱癌导向肽CSNRDARRC与中国人膀胱癌细胞系的亲和性及特异性进行鉴定,同时分离膀胱癌细胞与导向肽的结合蛋白,并对其进行分析鉴定。为将来临床上对膀胱肿瘤进行早期诊断、降低肿瘤术后残留率和靶向治疗提供一定的理论基础。 方法:将Matrigel基质胶作为中国人膀胱癌BIU-87细胞的悬浮剂,用注射器将癌细胞种植于裸鼠背侧皮下建立裸鼠移植瘤模型。通过化学方法合成多肽片段CSNRDARRC并对其进行标记,利用流式细胞技术及免疫组化技术,对导向肽与肿瘤细胞及肿瘤组织的亲和性及特异性进行鉴定。利用免疫亲和层析技术对导向肽的结合蛋白进行分离,并利用western blot和质谱分析技术对分离所得蛋白进行鉴定。 结果: 1、成功建立膀胱癌裸鼠移植瘤模型。 2、流式细胞技术及激光共聚焦显微镜技术在细胞水平的实验结果表示:小分子荧光探针FITC-CSNRDARRC与中国人膀胱癌细胞BIU-87的亲和性明显高于人肝癌细胞Hep-G2、人前列腺癌细胞PC-3、人宫颈癌细胞Siha和人胶质瘤细胞U-87。免疫组化实验表明:该导向肽能特异性地与肿瘤组织结合,而与正常组织几乎没有结合能力。 3、免疫亲和层析成功分离该导向肽的结合蛋白,对分离蛋白进行的western blot实验表明,该蛋白为导向肽的受体蛋白。质谱分析结果显示该受体蛋白可能为HSP90蛋白。 结论: 1.导向肽片段CSNRDARRC能与中国人膀胱癌BIU-87细胞和膀胱组织特异性结合,该肽段可作为中国人膀胱癌BIU-87细胞特异性地导向肽。 2.HSP90蛋白可能为导向肽CSNRDARRC在膀胱肿癌细胞上的受体蛋白。