背景和目的:龋病(Dental Caries)是在以细菌为主的多因素影响下,牙体硬组织发生慢性进行性破坏的一种疾病,是最为常见的一种口腔疾病。世界卫生组织已将其与癌症和心血管疾病并列为危害人类健康的三大疾病。牙菌斑是龋病发生过程中不可缺少的微生态环境。菌斑中细菌代谢碳水化合物产生的酸性代谢产物,可导致牙釉质脱矿、溶解,进而形成龋病。因此,只要能有效控制菌斑,就可以有效控制龋病的发生和发展。药物牙膏作为控制菌斑的方法之一,已在口腔自我保健措施中广泛应用,在牙膏中添加适宜的抗龋药物可以作为一种较为理想的防龋途径。近年来,天然药物作为医疗保健的一种替代选择,已经成为新药开发中的一种重要策略。蜂胶作为一种具有广泛药理作用的天然产物,能够抑制主要致龋菌的生长和粘附,并能有效控制菌斑形成,降低龋病发生。据文献报道蜂胶无毒副作用,使用安全,不产生耐药性。目前关于蜂胶的研究中,蜂胶牙膏的报道少见。将天然蜂胶加入牙膏中,通过日常刷牙控制菌斑,同时具备化学和机械控制的双重作用,有着广阔的开发前景。本研究用国产蜂胶醇提取物(EEP)进行体外抑菌实验,在此基础上研制一种蜂胶牙膏,通过体外抑菌实验和体内临床试验,观察其抑菌效果和对菌斑形成及菌斑pH变化的影响,探讨蜂胶防龋机制,为蜂胶的临床开发提供一定的实验依据。材料与方法1、将蜂胶醇溶液用95%乙醇,按1:2倍比稀释法,配成8种浓度的药液,厌氧条件下用轻唾琼脂培养基(MSA)培养变形链球菌和远缘链球菌。采用纸片扩散法,测量抑菌环大小,以确定蜂胶对两种链球菌的最小抑菌浓度(MIC)。2、采用纸片扩散法,以空白牙膏为阴性对照,0.2%洗必泰溶液为阳性对照,观测并比较5%、2.5%、1%和0.5%的蜂胶牙膏对变形链球菌和远缘链球菌的抑菌作用。3、采用完全随机对照的方法,选择健康志愿者40名,随机分为两组,实验前检测基线菌斑指数(PI0),分别使用空白牙膏(不含蜂胶)和1%蜂胶牙膏刷牙,每天2次,在使用1周和4周后复查,分别检测菌斑指数PI1和PI4,评价蜂胶牙膏抑制菌斑形成的临床效果。4、选择10名健康青年志愿者,选取右侧上下颌第一、二双尖牙邻面菌斑作为测试部位,要求此部位为健康牙面。采用自身前后对照研究方法,用自制微型pH电极原位检测含漱10%蔗糖溶液前后1小时内(0、2、5、10、15、20、30、40、50、60min十个时间点)牙菌斑pH的动态变化,并对比观察使用含蜂胶牙膏和不含蜂胶牙膏4周后,对漱糖前后1小时牙菌斑pH变化的影响。结果1、蜂胶醇溶液对变形链球菌和远缘链球菌均有良好的抑菌作用,其最小抑菌浓度分别为0.3125%(3.125mg/ml)和0.625%(6.25mg/ml),抑制作用随蜂胶浓度的升高而增强。2、各浓度蜂胶牙膏均能有效抑制变形链球菌和远缘链球菌的生长,其抑制作用具有明显的浓度依赖性;其中5%蜂胶牙膏对变形链球菌的抑菌作用与洗必泰的抑菌作用相同(P>0.05),对远缘链球菌的抑菌作用也与洗必泰接近。3、使用牙膏4周后,两组PI值较第1周都有所下降,组间比较具有统计学差异(P<0.05);两组自身前后比较,是实验组第4周PI变化幅度(?PI4)与第1周PI变化幅度(?PI1)比较,具有统计学差异(P<0.05)。4、先后使用两种牙膏刷牙4周后,菌斑pH在漱糖后的变化规律与基线Stephan曲线相似,均呈先下降后上升的变化趋势。用蜂胶牙膏刷牙4周后漱糖,菌斑pH值始终未低于临界pH值5.5以下,且5和10min时间点pH值及相关参数(pHmin和?pH)与基线Stephan曲线之间有统计学差异(P<0.05)。结论1、蜂胶对变形链球菌和远缘链球菌生长具有良好的抑制作用,显示了蜂胶良好的抑菌防龋性能。2、蜂胶牙膏能够有效抑制变形链球菌和远缘链球菌的生长,并具有明显浓度依赖性;5%蜂胶牙膏的抑菌作用与洗必泰接近。3、蜂胶牙膏控制菌斑形成效果明显优于不含蜂胶的空白对照牙膏;提示使用蜂胶牙膏刷牙,能有效控制龈上菌斑形成,具有一定的防龋效果。4、使用蜂胶牙膏刷牙4周后,可以减少摄糖后菌斑pH变化幅度,表明蜂胶能够通过牙膏形式应用于口腔局部,影响菌斑产酸代谢,达到预防龋病的作用。