目的：结核病(TB)是人类健康的主要威胁之一。1944年，链霉素的首次使用证明了结核杆菌能够被攻击并且在人体内能够被杀灭[1]。随后的20年中，迅速发展出了一系列抗结核药物，包括对氨基水杨酸(PAS)、异烟肼(INH)、吡嗪酰胺(PZA)、环丝氨酸(CS)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RIF)等。使用药物的联合治疗在TB感染的控制上非常有效[2]。但近几年来，随着耐多药结核病的发生和艾滋病患者的增多，全球出现第三次结核病的回升，使联合治疗的有效性受到挑战，给结核病控制带来了极大的困难。因此，迫切需要更新和更有效的抗结核药物。结核杆菌基因组测序工作的完成无疑为抗结核药的研究提供了新的方向，借此方法可以有效地鉴定参与结核杆菌重要生物合成途径的酶或蛋白质。同基因组比，蛋白质组在时间空间上具有多样性和研究的切入点多等特性，可以高效地帮助寻找药物作用靶点和筛选先导化合物。本文利用蛋白质组学方法，比较耻垢分枝杆菌mc2155经乙胺丁醇(EMB)、异烟肼(INH)、利福平(RIF)处理前后蛋白质表达的差异，为进一步探讨抗结核药物抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。 方法：1.最佳药物作用时间和浓度的确定：首先测定细菌生长曲线。待细菌O.D值达到0.7时，在各组培养基中分别加入终浓度不同的EMB、INH和RIF，每3小时间隔在600nm处测定空白组、EMB处理组、INH处理组和RIF处理组细菌培养液的O.D值，绘制生长曲线。2.药物处理样品的双向电泳分析：采用载体两性电解质pH4-6双向凝胶电泳技术分离EMB、INH和RIF处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的总蛋白质。3.电泳凝胶图像的分析：用PDQuest7.3.1图像分析软件比较分析，以找出差异表达的蛋白质。 结果：1.不同浓度的EMB、INH和RIF对耻垢分枝杆菌细胞增殖的抑制程度不同。药物处理3小时，细菌的增殖首次受到明显的抑制，三种药物的最佳处理浓度分别为24.0μg/ml(EMB)、0.08μg/ml(INH)、0.8μg/ml(RIF)。2.经过对蛋白质斑点进行软件分析，显示了可以被软件系统识别的蛋白质点，空白对照组有155个蛋白斑点，EMB处理组有蛋白斑点147个，INH处理组有蛋白斑点235个，RIF处理组有蛋白斑点161个，软件处理结果提供了表达差异程度不同的蛋白质点。 结论：1.三种药物对于耻垢分枝杆菌作用的最佳时间基本相同，但作用的最佳浓度却各不相同。2.乙胺丁醇、异烟肼、利福平处理前后耻垢分枝杆菌mc2155表现出明显的蛋白质的表达差异，提示该三种药物各具有不同的靶标和作用机理。