羊软骨硫酸软骨素的提取分离及抗氧化活性研究

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我国羊的饲养量和屠宰量位居世界前列,羊软骨是屠宰加工的副产品,是生产硫酸软骨素的良好来源。为了充分利用资源丰富的羊软骨,提高羊产业的附加值,本试验以羊软骨为原料,通过碱法、酶法和超滤法提取分离硫酸软骨素。通过单因素试验及二次回归正交旋转组合试验方法,筛选出最优工艺条件,从而提高硫酸软骨素产品得率和含量,试验还研究了硫酸软骨素抗氧化活性,为开发具有生物活性的羊软骨硫酸软骨素提供理论依据。主要研究结果如下:采用碱法提取羊软骨硫酸软骨素,通过单因素试验筛选影响因素和水平,在单因素试验的基础上采用二次回归正交旋转设计试验,根据回归分析确定最优提取工艺条件。结果表明最优工艺条件为:料液比1:6.5、碱提时间2h、碱提温度35℃、碱液浓度7%,在最佳条件下碱法提取硫酸软骨素得率为12.65%。采用酶法提取羊软骨硫酸软骨素,通过单因素试验筛选影响因素和水平,在单因素试验的基础上采用二次回归正交旋转设计试验,根据回归分析确定最优提取工艺条件。结果表明最优工艺条件为:料液比0.9:1000、pH值8.3、酶解温度47℃、酶解时间170min,在最佳条件下酶法提取硫酸软骨素得率为15.87%。采用超滤法分离纯化硫酸软骨素,确定了操作最佳条件为:操作压力0.18MPa,操作温度20℃。在最佳条件下超滤法分离纯化硫酸软骨素的含量达到90.21%,得率达到14.36%。试验通过傅里叶变换红外光谱及离子色谱对所制得硫酸软骨素样品进行结构及单糖组成鉴定,结果表明所制硫酸软骨素样品与Sigma公司硫酸软骨素标准品结构组成相一致。利用体外化学方法证明了硫酸软骨素具有较强抗氧化活性。硫酸软骨素对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH自由基均有清除作用,清除效果与硫酸软骨素的浓度呈正相关,硫酸软骨素还原能力随着浓度的增大逐渐增强。
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