犬H5N2亚型流感病毒的致病和传播特性实验研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangzhaodsg
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一直以来人们并不认为流感病毒可以感染犬和猫。然而,这种结论很快被推翻。人们先后分离到犬流感病毒H3N8, H3N2,H5N1以及H1N1。并且大多数的H5N2亚型流感病毒都是从禽类中分离到的,很少从哺乳动物中分离到。2009年我实验室分离到一株A/canine/Shandong/JT01/2009(H5N2)毒株简称CA/SD/JT01/09(H5N2),但是对于其致病性和传播性尚不清楚。因此我们通过以犬、小白鼠和鸡作为实验动物模型,进行其致病性和传播性研究。在致病性实验中,我们发现Dp1组接种犬中有5只在接种后3-6天表现出了类似流感样临床症状;6只在接种后2-3天体温升高,之后体温恢复正常。7、14、21天犬血清检测发现,Dp1组接种犬的血清全部呈阳性。所有实验动物的直肠拭子中未出现排毒情况,而Dp1组接种犬的鼻拭子洗脱液在1-5天呈阳性。之后采取RT-PCR的方法对血凝阳性的鼻拭子样品进行病毒检测,发现检测到的病毒与原病毒一致。另外,我们对1只接种犬和1只对照犬进行剖检取样,用RT-PCR的方法从接种犬的鼻、气管和肺脏组织中分离到流感病毒,而且该流感病毒与原病毒一致,而对照犬中却没有分离到病毒。与犬不同的是, Mp1组接种的小白鼠没有表现出临床症状,但是14天时抗体呈阳性,21天抗体消失。Mp2组对照组未表现任何临床症状,抗体为阴性。在鸡的动物模型实验中,Cp1组接种鸡表现出了较明显的流感样临床症状,对发病鸡进行剖检时,发现部分鸡出现了明显的流感病毒剖检变化。Cp2组对照组鸡无临床症状。病理组织学检查发现,在鸡的十二指肠、脾脏、肺、法氏囊、肝脏、肾脏、胰腺、心脏等器官内都产生了病变等。通过RT-PCR的方法对上述器官进行病毒分离鉴定,结果显示都检测到了病毒,且与原病毒一致。在传播性实验中,结果发现Dt1组哨兵犬中有4只在与Ds1组接种犬同居5-7天后,表现出了流感样临床症状,5只犬在4-5天时体温升高,接着很快恢复正常,另外在14天与21天时从所有哨兵犬体内检测到了流感抗体。通过RT-PCR的方法在同居后3-6天从6只哨兵犬的鼻拭子中分离到该病毒,并且发现该流感病毒与原病毒一致。在同居后4天,我们通过RT-PCR的方法,从1只哨兵犬的鼻、气管和肺脏中成功分离到并确定了该病毒与原病毒一致。与致病性实验一样,5只哨兵鼠并没有表现出任何临床症状,但是14天时抗体阳性,而到21天时血清抗体呈阴性。通过实验发现,哨兵鸡的临床症状与病理组织学检查与致病性实验中接种鸡相同,通过RT-PCR方法检测也确定该病毒与与原病毒一致的病毒。综上结果表明,该流感病毒能够感染犬、鸡和小白鼠,也能够在种属间和种属内进行传播,虽然其致病性较弱,不能造成易感动物的死亡,但是作为易感动物的犬,极有可能作为中间宿主为病毒传染给人提供一种可能。
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